Characterization and vectorization of siRNA targeting RET/PTC1 in human papillary thyroid carcinoma cells

Abstract

RET/PTC1 fusion oncogene is the most common genetic alteration identified to date in thyroid papillary carcinomas (PTC) and represents a good target forsmall interfering RNA (siRNA). Our aim was: i) to target the RET/PTC1 oncogene by siRNAs, ii) to assess the knockdown effects on cell growth and cell cycle regulation and iii) to vectorize it in order to protect it from degradation. Methods. Human cell lines expressing RET/PTC1 were transfected by siRNA RET/PTC1, inhibition of the oncogene expression was assessed by qRT-PCR and by Western blot. Conjugation of siRNA RET/PTC1 to squalene was performed by coupling it to squalene. In vivo studies are performed in nude mice. Conclusion. In this short com- munication, we report the main published results obtained during last years. Keywords: RET/PTC1, siRNA, thyroid papillary carcinomas.

Злитий онкоген RET/PTC1 є найзагальнішою генетичною зміною, ідентифікованою на сьогодні при папілярних ракових захворюваннях щитоподібної залози (PTC); він являє собою гарну мішень для малих інтерферуючих РНК (міРНК). Мета роботи полягала у 1) дії на онкоген RET/PTC1 за посередництвом siРНК; 2) оцінюванні пошкоджуючого впливу на ріст клітин та і регуляцію клітинного циклу; 3) векторизації для захисту від деградації. Методи. Клітинні лінії людини, які експресують RET/PTC1 були трансфековані міРНК RET/PTC1, інгібування експресії даного онкогену аналізували qRT-PCR і вестерн блот. міРНК RET/PTC1 кон’югували зі скваленом . In vivo дослідження проводилися на безтимусних мишах. Висновки. У даному короткому повідомленні представлено основні опубліковані результати, отримані останніми роками. Ключові слова: RET/PTC1, міРНК, папілярна карцинома щитоподібної залози.

Слитый онкоген RET/PTC1 является самым общим генетическим изменением, идентифицированным на сегодня при папиллярных раковых заболеваниях щитовидной железы (PTC); он представляет собой хорошую мишень для малых интерферирующих РНК (миРНК). Цель работы состояла в 1) воздействии на онкоген RET/PTC1 посредством миРНК; 2) оценке повреждающего влияния на рост клеток и регуляцию клеточного цикла; 3) векторизации для защиты от деградации. Методы. Клеточные линии человека экспрессирующие RET/PTC1 были трансфецированы миРНКRET/PTC1, ингибирование экспресии данного онкогена анализировалось qRT-PCR и вестерн блоттом. миРНК RET/ PTC1 конъюгировали со скваленом. In vivo исследованя проводились на безтимусны мышах. Выводы. В данном коротком сообщении мы представляем основные опубликованные результаты, полученные в последние годы. Ключевые слова: RET/PTC1, миРНК, папиллярная карцинома щитовидной железы.