Ідентифікація вірусу CyHV-3 методами електронної мікроскопії та полімеразної ланцюгової реакції

Abstract

Дослiджено герпесвiрус коропових риб третього типу (CyHV-3), який викликає висококонтагiозну iнфекцiю у декоративного коропа коi та у коропа звичайного (Cyprinus carpio). Були застосованi ПЛР-дiагностика та електронномiкроскопiчне дослiдження морфологiї та репродукцiї CyHV-3 методом ультратонких зрiзiв. При електронномiкроскопiчному дослiдженнi очищених вiрiонiв CyHV-3 виявлено вiруснi частки такого ж дiаметра, що й на ультратонких зрiзах уражених клiтин. Цi препарати використано як контроль при адаптацiї методу ПЛР для дiагностики CyHV-3. Показано, що дослiдженi пари олiгонуклеотидних праймерiв, специфiчних до гена тимiдинкiнази CyHV-3, амплiфiкують фрагмент ДНК вiрусу розмiром близько 400 пар нуклеотидiв. Цi праймери можуть бути використанi для експрес-дiагностики CyHV-3 в рибних господарствах та рiчках України.

Исследован герпесвирус карповых рыб третьего типа (CyHV-3), который вызывает висококонтагиозную инфекцию у декоративного карпа кои и у карпа обычного (Cyprinus carpio). Применяли ПЦР-диагностику и электронномикроскопическое исследование морфологии и репродукции CyHV-3 методом ультратонких срезов. При электронномикроскопическом исследовании очищенных вирионов CyHV-3 обнаружены вирусные частички такогоже диаметра, как и на ультратонких срезах пораженных клеток. Эти препараты использованы в качестве контроля при адаптации метода ПЦР для диагностики CyHV-3. Показано выбранные пары олигонуклеотидных праймеров, специфических к гену тимидинкиназы CyHV-3, амплифицировали фрагмент ДНК вируса размером примерно 400 пар нуклеотидов. Эти праймеры могут быть использованы для експресс-диагностики CyHV-3 в рыбных хозяйствах и речках Украины.

The carp herpes virus type III (CyHV-3), which causes the highly contagious infection of ornamental koi carp and common carp (Cyprinus carpio), is investigated. The goal of this research was to use the method of PCR for virus diagnostics and electron microscopy of purified virions and ultra thin sections of infected tissue for the investigation of CyHV-3 morphology and reproduction. It is shown that purified CyHV-3 viral particles have the same size as that in ultrathin sections of infected cells. These samples were used as a control in PCR for CyHV-3 diagnostics. We selected a pair of oligonucleotide primers specific to the thymidine kinase gene of CyHV-3, which amplified virus DNA fragment of approximately 400 base pairs. These primers can be used for the CyHV-3 virus rapid diagnostics at fish farms and rivers of Ukraine.