Зміни просторової орієнтації αС-регіонів фібриногену в процесі його трансформації в полімерний фібрин

Abstract

Отримано монАТ FnII-2М, епітоп для яких знаходиться в фрагменті Аα 240–491 αС-регіону фібрин(оген)у людини. З використанням імуноферментного аналізу та методу поверхнево-плазмонного резонансу було показано, що монАТ FnII-2M не реагували з фібриногеном, мономерним і полімерним фібрином desA, але реагували з фібрином desАВ. Отже, лише після відщеплення фібринопептидів В епітоп для монАТ FnII-2M стає доступним. Отримані результати дають змогу припустити, що в фібриногені та мономерному й полімерному фібрині desA αС-регіони зв'язані з фібринопептидами В і відходять від остова молекули лише після їх відщеплення. На підставі отриманих результатів та наведених в науковій літературі даних комп'ютерно побудовано моделі просторової орієнтації αС-регіонів у молекулах фібриногену, фібрину desA й desAB.

Получены монАТ FnII-2М, эпитоп для которых находится во фрагменте Аα 240–491 αС-региона фибриногена человека. С использованием иммуноферментного анализа и метода поверхностно-плазмонного резонанса было показано, что монАТ FnII-2M не реагировали с фибриногеном, мономерным и полимерным фибрином desА, но реагировали с фибрином desАВ. Следовательно, лишь после отщепления фибринопептидов В эпитоп для монАТ FnII-2М становится доступным. Полученные результаты позволяют предположить, что в фибриногене, мономерном и полимерном фибрине desA αС-регионы связаны с фибринопептидами В и отходят от остова молекулы лишь после их отщепления. На основе полученных результатов и данных, приведенных в научной литературе, компьютерно построено модели пространственной ориентации αС-регионов в молекулах фибриногена, фибрина desА и desАВ.

Monoclonal antibody (monAb) FnII-2M with the epitope for them in human fibrin(ogen) fragment Aα 240–491 of the αC-region has been obtained. It is shown by ELISA and the method of surface plasmon resonance that monAb FnII-2M doesn't react with fibrinogen, monomeric and polymeric fibrin desA, but reacts with fibrin desAB. Thus, this proves that the accessibility of the epitope for this monAb appears only in fibrin desAB. These results are a direct experimental evidence that the αC-regions (Aα 220–610) are bound with fibronopeptide B of fibrinogen and fibrin desA molecules but move away from the framework of a molecule only after the removal of fibrinopeptides B by thrombin. These data and the results of other authors allow us to design the computer models of spatial orientation of αC-regions in fibrinogen, fibrin desA, and fibrin desA.