Дія 3-децилоксикарбонілметил-4-метил-5-(β-гідроксіетил)тіазолій хлориду на струм К+ іонними каналами, утвореними ністатином у бішаровій ліпідній мембрані

Abstract

Аплікація 0,1 мM 3-децилоксикарбонілметил-4-метил-5-(β-гідроксіетил)тіазолій хлориду – cтруктурного аналога вітаміну B1 (тіаміну) – у цис-відділення комірки з вміщуючою холестерол бішаровою фосфоліпідною мембраною у розчині 100 мM KCl спричинює зворотне зменшення струму через утворені ністатином канали, які реконструйовано з того самого боку мембрани, на 67 ± 3%. Провідність таких каналів, вбудованих у ліпідний бішар мембрани з цис-сторони, не змінюється, коли 0,1 мM тіазолієвий аналог вітаміну B1 введено у транс-відділення комірки з модифікованою мембраною. Кінетика інгібування цим аналогом за різних концентрацій індукованого ністатином трансмембранного струму не виявляє кооперативності, що свідчить про зв’язування блокатора лише з одним негативно зарядженим центром каналу, а відносно висока pK його дисоціації (5,17) дає можливість зробити висновок, що цей центр здатний забезпечувати специфічну взаємодію з таким хлоридом.

Аппликация 0,1 мM cтруктурного аналога витамина B1 (тиамина) – 3-децилоксикарбонил-метил-4-метил-5-(β-гидроксиэтил)тиазолий хлорида (ДMГT) с цис-стороны, содержащей холестерол бислойной фосфолипидной мембраны в симметричном растворе 100 мM KCl вызывает обратимое уменьшение проводимости нистатиновых каналов, реконструированных с той же стороны мембраны, на 67 ± 3%. Проводимость нистатиновых каналов, встроенных в липидный бислой мембраны с цис-стороны, не изменяется, когда ДМГТ вводили с противоположной (транс-стороны) модифицированной мембраны. Кинетика ингибирования ДМГТ односторонних нистатиновых каналов не проявляет кооперативности и позволяет предположить, что ДМГТ связывается только с одним отрицательно заряженным центром канала. Относительно высокая pK диссоциации ДМГТ (5,17) дает возможность заключить, что такой центр способен специфически взаимодействовать с ДМГТ.

The application of 0.1 mM of vitamin B1 (thiamine) structural analogue, 3-decyloxycarbonylmethyl-4-methyl-5-(β-hydroxyethyl)thiazole chloride (DMHT) from the cis-side of cholesterol-containing phospholipid bilayer membrane in symmetric solution of 100 mM KCl reversibly reduced the conductance of nystatin channels, reconstituted from the same side of membrane, by 67 ± 3%. The conductance of nystatin channels applied to the cis-side of bilayer membrane remained unaffected, when DMHT was introduced separately to the opposite trans-side of modified membrane. The kinetics of nystatin channels inhibition with DMHT showed no cooperativity allowing to expect that negatively charged ionogenic groups of these channels formed one DMHT binding site per channel. Relatively high pK of binding with nystatin channels (5,17) suggests that this site provides specific interaction with DMHT.