Іммобілізовані одноланцюгові антитіла для афінного очищення рекомбінантного інтерферону α2b людини

Домашня сторінка
→
Хімічні та біологічні науки
→
Відділення біохімії, фізіології та молекулярної біології
→
Biopolymers and Cell
→
Біополімери і клітина, 2006, том 22
→
Біополімери і клітина, 2006, № 2
→
Переглянути статтю

Іммобілізовані одноланцюгові антитіла для афінного очищення рекомбінантного інтерферону α2b людини

Гільчук, П.В. ; Окунєв, О.В. ; Іродов, Д.М. ; Павлова, М.В. ; Яковенко, О.Я.

Інші назви: Иммобилизованные одноноцепочечные антитела для аффинной очистки рекомбинантного IFN-α2b человека
Immobilized single chain antibodies for affinity purification of recombinant human IFN-α2b

Тема: Молекулярна та клітинна біотехнології

УДК: 579.69 + 577.112 + 543.544.17

Інший ID: DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.00072B

URI: http://dspace.nbuv.gov.ua/handle/123456789/156478

Посилання: Іммобілізовані одноланцюгові антитіла для афінного очищення рекомбінантного інтерферону α2b людини / П.В. Гільчук, О.В. Окунєв, Д.М. Іродов, М.В. Павлова, О.Я. Яковенко // Біополімери і клітина. — 2006. — Т. 22, № 2. — С. 157-161. — Бібліогр.: 12 назв. — укр., англ

Підтримка: Автори висловлюють щиру подяку співробітникам Інституту біохімії ім. О. В. Палладіна НАН України С. І. Андріанову, О. Ю. Сломінському і проф. Г. Л. Волкову за методичні вказівки та можливість користування ультрафільтраційним і хроматографічним обладнанням, а також співробітникам ВНДК «Фарм Біотек» — за надання екстрактів білків — продуцентів Е. соїі для проведення очищення рекомбінантного IFN-a2b людини.

Дата: 2006

Завантажень: 375

Іммобілізовані одноланцюгові антитіла для афінного очищення рекомбінантного інтерферону α2b людини

Анотація:

Представлено лабораторний метод отримання афінного імуносорбенту для хроматографічного очищення білків, який полягає в орієнтованій і нековалентній іммобілізації рекомбінантних фрагментів антитіл на целюлозному носії. На основі ДНК-послідовностей одноланцюгових антитіл (ScFv) до інтерферону IFN-α2b людини і целюлозозв'язувального домену (CBD) із целюлозолітичного комплексу Clostridium thermocellum сконструйовано злитий білок (ScFv-CBD). Після експресії гена ScFv-CBD в Escherichia coli і виділення цільового білка у функціонально активній формі здійснено його пряму іммобілізацію на мікрогранулярній целюлозі Целюлозу з іммобілізованим ScFv-CBD використано як афінний сорбент для очищення рекомбінантного IFN-α2b людини.

A laboratory method for obtaining immunoaffine media for chromatographic purification of proteins based on orienting and non-covalent immobilization of recombinant antibody fragments on cellulose matrix is described. The single-chain antibody (ScFv) against human IFN-α2b was genetically fused to cellulose-binding domain (CBD) from cellulosome complex of Clostridium thermocellum and expressed in Escherichia coli. After the isolation of the target protein in functionally active form from bacteria cells the directed immobilization on microgranular cellulose has been carried out. The cellulose with immobilized ScFv-CBD-fusion was used as affinity medium to perform the purifications of recombinant human IFN-α2b

Представлен лабораторный метод получения иммуноаффинного сорбента для хроматографической очистки белков, основанный на ориентированной и нековалентной иммобилизации рекомбинантных фрагментов антител на целлюлозном носителе. На основе ДНК-последовательностей однонитчатых антител (ScFv) к IFN-α2b человека и связывающего целлюлозу домена (CBD) из целлюлозолитического комплекса Clostridium thermocellum сконструирован слитый белок (ScFv-CBD). После экспрессии ScFv-CBD в клетках Escherichia coli и выделения целевого белка в функционально активной форме проведена его прямая иммобилизация на микрогранулированной целлюлозе. Целлюлоза с иммобилизованным ScFv-CBD использована как аффинный сорбент для очистки рекомбинантного IFN-α2b человека.

Показати повний запис статті