Інсерційним мутагенезом in vitro з наступним заміщенням нашивної хромосомної копії реІХ гена на мутовану створено дефектний за продукцією екзопектатліази штам K. oxytoca VN13. За допомогою створеного мутанта встановлено наявність у геномі К. oxytoca VN13 лише одного гена з даною нуклеотидною послідовністю. Показано, що у К. oxytoca VN13 є додатковий пектатліазний ген, нуклеотидна послідовність якого суттєво відрізняється від послідовності реІХ гена. Виявлено суттєво нижчий рівень пектатліазної активності мутантного штаму порівняно із загальною пектатліазною активністю К oxytoca VN13 дикого типу. Визначено, що експресія клонованого реІХ гена не є необхідною для засвоєння полігалактуронату цією бактерією.
Инсерционным мутагенезом in vitro с последующим замещением нашивной хромосомной копии pelX гена мутированной создан дефектный по продукции екзопектатлиазы штамм K. oxytoca VN13. При помощи созданного мутанта определено наличие в геноме K. oxytoca VN13 только одного гена с данной нуклеотидной последовательностью. Показано, что у К oxytoca VN13 есть дополнительный пектатлиазный ген, нуклеотидная последовательность которого существенно отличает ся от последовательности pelX гена. Выявлен существенно более низкий уровень пектатлиазной активности мутантного штамма в сравнении с общей пектатлиазной активностью K. oxytoca VN13 дикого типа. Установленоно, что экспрессия клонированного pelX гена не является необходимой для усвоения полигалактуроната этой бактерией.
An insertionally inactivated copy of the pelX gene of K. oxytoca VN13 was used for the wild type gene substitution by reciprocal recombination. The presence in K. oxytoca VN13 genome of the additional pectate lyase gene with nucleotide sequence differing from the pelX gene was revealed. A considerably lower level of the pectate lyase activity of the mutant K. oxytoca VN13 strain compared to the wild type strain was determined. It was shown, that the pelX gene expression is not essential for polygalacturonate assimilation by this bacterium.
