Суперспиральная ДНК политенных хромосом Chironomus thummi

Abstract

Предложен микровариант флюоресцентного метода измерения степени суперспиральности 0 ДНК в растворе, гелях и хромосомах. Измерения а ДНК депротеинизированных политенных хромосом свидетельствуют, что на один нуклеосомный повтор приходится 1,84÷1,88 витка ДНК. Полученные данные позволяют заключить, что при –σ>0,06 3÷8 % ДНК переходят в неканонические формы, аккумулирующие в себе часть супервитков.

Запропоновано мікроваріант флуоресцентного методу вимірювання ступеня суперспіральності σ ДНК у розчині, гелях і хромосомах. Вимірювання ДНК депротеїнізованих політенних хромосом свідчать про те, що на один нуклеосомної повтор припадає 1,84÷1,88 витка ДНК. Отримані дані дозволяють зробити висновок, що при –σ > 0,06 3÷8 % ДНК переходять у неканонічні форми, які акумулюють у собі частину супервитків.

The fluorescent micromethod of measurement of DNA superhelical density a in solutions gels o r chromosomes is proposed. EtBr intercalation is used to equalize the EtBr-binding properties of the supercoiled and nicked DNA molecules. The number of 1.84÷1.88 left turns of DNA molecule per nucleosome is estimated from the measured value – σ = 0.094 for the nucleoids of Chironomus thummi polytene chromosomes. Experimental data indicate that about 3÷6 % of DNA in the nucleoids adopts non-canonical forms when – σ>0.06.