Особливості культивування та контактної взаємодії in vitro кріоконсервованих мультипотентних стромальних клітин тимуса з гемопоетичними клітинами

Abstract

Вивчено особливості поведінки у культурі in vitro кріоконсервованих і свіжовиділених мультипотентних стро- мальних клітин (МСК) тимуса мишей лінії СВА. Даний тип клітин має певний поверхневий імунофенотип та високу здатність до диференціювання за остео- та адипогенним напрямками у спеціальних середовищах. Після культивування у скляних чашках Петрі, пластикових планшетах і на целофані свіжовиділені та кріоконсервовані клітини показували схожі властивості. При цьому свіжовиділені та кріоконсервовані МСК тимуса на скляній та пластиковій поверхнях формували фібробластні колонії, а на целофані спостерігався їх зливний рост. Встановлено, що МСК тимуса мають мембранну спорідненість до тимоцитів, лімфоцитів лімфатичних вузлів і клітин фетальної печінки. Це обумовлює їх здатність до контактної взаємодії з різними гемопоетичними клітинами з формуванням асоціацій у вигляді фібробласто-лімфоцитарних розеток (ФЛР). Найбільш ефективна контактна взаємодія (утворення ФЛР) здійснюється за участю МСК і тимоцитів, хоча значну кількість ФЛР утворюють також клітини лімфатичних вузлів і фетальної печінки мишей. Кріоконсервування МСК не впливає на їх здатність до контактної взаємодії, що підтверджує можливість використання кріоконсервування для створення відповідних клітинних трансплантатів.

Изучены особенности поведения в культуре in vitro криоконсервированных и свежевыделенных мультипотентных стромальных клеток (МСК) тимуса мышей линии СВА. Данный тип клеток имеет определенный поверхностный иммунофенотип и высокую способность к дифференцировки в остео- и адипогенном направлениях в специальных средах. После культивирования в стеклянных чашках Петри, пластиковых планшетах и на целлофане свежевыделенные и криоконсервированные клетки показывали схожие свойства. При этом свежевыделенные и криоконсервированные МСК тимуса на стеклянной и пластиковой поверхностях формировали фибробластные колонии, а на целлофане наблюдался их сливной рост. Установлено, что МСК тимуса имеют мембранное сродство к тимоцитам, лимфоцитам лимфатических узлов и клеток фетальной печени. Это обусловливает их способность к контактному взаи- модействию с различными гемопоэтическими клетками с формированием ассоциаций в виде фибробласто-лимфоцитарных розеток (ФЛР). Наиболее эффективное контактное взаимодействие (образование ФЛР) осуществляется при участии МСК и тимоцитов, хотя значительное количество ФЛР образуют также клетки лимфатических узлов и фетальной печени мышей. Криоконсервирование МСК не влияет на их способность к контактному взаимодействию, что подтверждает возможность использования криоконсервирования для создания соответствующих клеточных трансплантатов.

The cultural properties of cryopreserved and freshly isolated thymic multipotent stromal cells (MSCs) of CBA mice were investigated. This cell type has certain surface immune phenotype and high ability to differentiation in osteogenic and adipogenic directions in special media. Fresh and cryopreserved cells showed similar properties when cultured in glass petri dishes, plastic plates and cellophane. Both fresh and cryopreserved MSCs of thymus formed fibroblast colonies on glass and plastic surfaces. Cell growth was observed on cellophane. The thymus MSCs were found to have a membrane affinity for thymocytes, lymphocytes of lymph nodes and fetal liver cells. This determined their ability to interact with various hematopoietic cells with the formation of clusters in the form of fibroblast-lymphocytic rosettes (FLR). The most effective contact interaction (FLR formation) occured when the MSCs and thymocytes were involved, nevertheless the cells of mice lymph nodes and fetal liver also formed a significant number of FLRs. MSCs cryopreservation did no affect their ability to the contact interaction, that confirmed the possibility of using the cryopreservation to create appropriate cell transplants.