Модифікація епітеліальномезенхімального переходу в клітинах раку молочної залози внаслідок їх кокультивування з фібробластами та клітинами кісткового мозку

Abstract

Мета: дослідити взаємодію пухлинних клітин з деякими компонентами мікрооточення для визначення можливої ролі останніх у модифікації фенотипу пухлинних клітин при розвитку дисемінованого пухлинного процесу із залученням кісткового мозку (КМ). Об’єкт і методи: дослідження проводили з використанням біоптатів КМ хворих на рак молочної залози (РМЗ) з різним перебігом пухлинного процесу та постійних культур клітин: використовували методи роботи з культурами клітин, імуноцитохімічний та статистичний методи аналізу. За допомогою створеної системи безконтактного кокультивування пухлинних і нормальних клітин досліджували їх фенотипічний профіль, характеризуючи рівень експресії маркерів епітеліально-мезенхімального переходу (ЕМП) (білки адгезії та цито скелета і транскрипційний фактор Slug), стовбурових пухлинних клітин (CD44), а також регулятора клітинного циклу р21. Результати: виявлено значну відмінність у ростових і фенотипічних характеристиках досліджуваних клітин залежно від ЕМП-статусу пухлинних клітин і від варіанта їх кокультивування: використання клітин з КМ пацієнтів з різним характером перебігу пухлинного процесу (прогресування чи ремісія захворювання). Висновок: виявлено модифікуючий вплив in vitro мононуклеарів КМ хворих на РМЗ на пухлині клітини залежно від перебігу захворювання. Зокрема, встановлено факт стимуляції ЕМП пухлинних клітин при дії на них факторів, які, можливо, продукуються клітинами КМ хворих в стадії прогресування захворювання.

Objective: the goal of our study was to investigate the interaction between tumor cells and some components of their microenvironment for identification leading factors in tumor progression. Object and methods: we used primary (biopsies of bone marrow breast cancer patients with different stages of disease) and cell culture lines (human breast cancer cell line, rat breast cancer cell line, human normal fibroblasts) with immunocytochemical analysis and statistical methods. The proliferative potential and immunophenotypical features of tumor and normal cells were revealed in our new co-cultivation system in vitro, which include investigation to markers of epithelial — mesenchymal transition and tumor stem cells (adhesion protein and cytoskeleton — E-cadherin, Vimentin, CD44), protein of cell cycle p21 and transcription factor Slug. Results: it was revealed the great differences in growth and phenotypic features of these cells which depended on EMT status of tumor cells and version of co-cultivation (using the bone marrow cells of breast cancer patients with progression or remission stage of disease). Conclusion: modifying effects of bone marrow mononuclears of breast cancer patients in tumor cells, depending on the disease were found in vitro. In particular, the fact that epithelial-mesenchymal transition stimulation of tumor cells exposed to factors that may be produced by bone marrow cells of patients in stage of disease progression was determined.