http://dspace.nbuv.gov.ua:80/handle/123456789/133116 Tue, 21 Apr 2026 18:59:36 GMT 2026-04-21T18:59:36Z http://dspace.nbuv.gov.ua:80/bitstream/id/395769/ http://dspace.nbuv.gov.ua:80/handle/123456789/133116 http://dspace.nbuv.gov.ua:80/handle/123456789/139922 Impact of IFN-g gene polimorphism on the risk of cervical cancer Kordi Tamandani, M.K.; Sobti, R.C.; Shekari, M.; Suri, V. Cervical cancer, the second most common malignancy in women worldwide, is almost invariably associated with infection by human papillomavirus (HPV). However, although many women are infected with high-risk types of HPV, only a subset of infected women will ever develop cervical cancer. Several studies suggested that immunological components play a key role in the development of cervical cancer. Interferon gamma (IFN-g) is a cytokine produced by activated T cells and natural killer (NK) cells that enhances cellular immune responses by increasing T-cell cytotoxicity and NK cell activity. Aim: To study single nucleotide polymorphism (SNP), T to A, located at the +874 position and measure IFN-g messenger RNA (mRNA) at the tumor site. Methods: DNA was isolated from peripheral blood of 200 patients with cervical cancer and 200 healthy controls. The allele polymorphism at position +874 in the IFN-g gene was studied by ARMS-PCR (Amplification Refractory Mutation System) and measured IFN-g mRNA at the tumor site by means of a semi-quantitative polymerase chain reaction (sqRT-PCR) assay. Results: It was observed that genotypes AT and AA + AT increase the risk of cervical cancer (OR = 3.3, 95% CI — 2.05–5.2, P ≤ 0.001 — OR = 2.9, 95% CI — 1.9–4.6, P ≤ 0.001, respectively). In case of passive smokers same genotypes showed highly significant increased risk of cervical cancer (OR = 5.55, 95% CI = 2.77–11.19 — OR = 5.25, 95% CI = 2.77–10, respectively). Thus, the sqRT-PCR reflected the similar level of mRNA expression of IFN-g gene in patients suffering from cervical carcinoma and healthy controls. Conclusion: This is the first study to provide an evidence for effecting of IFN-g gene on the risk of cervical cancer in north Indian population.; Рак шейки матки является второй по распространенности опухолью у женщин во всем мире, и почти неизменно ассоциирован с инфицированием вирусом папилломы человека (HPV). Тем не менее, хотя многие женщины инфицированы HPV с высоким риском развития рака шейки матки, только у некоторых из них развивается данное злокачественное заболевание. Несколько проведенных ранее исследований показали, что иммунологические компоненты играют важную роль в развитии рака шейки матки. Гамма-интерферон (IFN-γ) является цитокином, который продуцируется активированными Т-клетками и естественными киллерными клетками (NK), что приводит к повышению эффективности клеточных иммунных ответов, способствуя усилению цитотоксичности Т-клеток и активности NK-клеток. Цель: изучить одиночный нуклеотидный полиморфизм (SNP), замену T на A в положении +874 и оценить уровень экспрессии РНК, кодирующей IFN-γ, в опухоли. Методы: ДНК выделяли из периферической крови 200 больных раком шейки матки и 200 здоровых доноров. Аллельный полиморфизм гена IFN-γ в положении +874 изучали с помощью ARMS-PCR (Amplification Refractory Mutation System). Оценку количества кодирующей IFN-γ мРНК в опухоли проводили с помощью полуколичественной обратной полимеразной реакции (sqRT-PCR). Результаты: показано, что генотипы AT и AA + AT повышают риск развития рака шейки матки (OR = 3,3; 95% CI — 2,05–5,2; P ≤ 0,001 — OR = 2,9; 95% CI — 1,9–4,6; P ≤ 0,001). В случае пассивных курильщиков при тех же генотипах отмечено очень существенное повышение риска развития рака шейки матки (OR = 5,55; 95% CI = 2,77–11,19 — OR = 5,25; 95% CI = 2,77–10). В то же время sqRT-PCR показал, что мРНК IFN-γ экспрессирована на одинаковом уровне у больных раком шейки матки и у здоровых доноров. Выводы: проведено первое исследование, доказывающее вклад полиморфизма гена IFN-γ в риск развития рака шейки матки у жительниц северной части Индии. Tue, 01 Jan 2008 00:00:00 GMT http://dspace.nbuv.gov.ua:80/handle/123456789/139922 2008-01-01T00:00:00Z http://dspace.nbuv.gov.ua:80/handle/123456789/139919 Epothilone B induces glioblastoma cell death via survivin down-regulation Quick, Q.A. The clinical resistance of glioblastomas to chemotherapeutic agents can be attributed to drug efflux pumps, such as P-glycoprotein, which contributes to reduce drug efficacy. The present study examined the utility of epothilone B, which is not a substrate for P-glycoprotein, on glioblastoma cells. Methods: In vitro methods with glioblastoma cells varying in p53 status were used to assess the efficacy of epothilone B to induce anti-neoplastic responses. Immunofluorescence and ELISA procedures were used to examine levels of tubulin and survivin in epothilone B treated glioblastoma cells, while acridine orange labeling was used to detect the mode of epothilone B induced cell death. Results: A clinically achievable concentration of epothilone B induced a cytotoxic response in p53 mutant glioblastoma cells, as a consequence of survivin down-regulation and tubulin redistribution, while a cytostatic response was observed in p53 null glioblastoma cells with a modest increase in survivin expression post-epothilone B treatment. However, p53 wild-type glioblastoma cells did not sustain a positive anti-tumorigenic response to epothilone B. Conclusion: Epothilone B, induced positive differential responses in glioblastoma cells with abnormal p53 status, but not in p53 wild-type cells. This suggests that epothilone B is a potential alternative to classic microtubule inhibiting agents (ie vincristine, paclitaxel) used to treat clinical glioblastomas with p53 mutations.; Клиническая резистентность глиобластом к химиотерапии может быть объяснена действием насосов, откачивающих препараты, подобные P-гликопротеину, которые играют важную роль в снижении эффективности лекарственных средств. Цель: изучить возможность применения эпотилона В, не являющегося субстратом для Р-гликопротеина, для воздействия на глиобластомные клетки. Методы: для оценки эффективности эпотилона В как антинеопластического препарата в работе in vitro использованы клеточные линии глиобластомы, отличающиеся по статусу p53. Для оценки уровня экспрессии тубулина и сурвивина в клетках, обработанных эпотилоном В, были использованы методы иммунофлуоресценции и ELISA. Окрашивание акридиновым оранжевым применяли для детекции погибших клеток после обработки эпотилоном В. Результаты: клинически достижимые концентрации эпотилона В оказывали цитотоксический ответ на клетки глиобластомы с мутантным р53 в результате снижения уровня сурвивина и перераспределения тубулина. В то же время цитостатический эффект наблюдали и на клетках глиобластомы, не экспрессирующих р53, что сопровождалось небольшим повышнием экпрессии сурвивина после обработки клеток эпотилоном В. Однако на клетках глиобластомы с р53 дикого типа не было выявлено антиопухолевого ответа на эпотилон В. Выводы: эпотилон В вызывает различный противоопухолевый ответ в клетках глиобластомы, экспрессирующих мутантный р53, либо отрицательных по р53. Это позволяет предположить, что эпотилон В является альтернативой классическим препаратам, ингибирующим микротрубочки (например винкристину, паклитакселу), которые используют в клинической практике при лечении глиобластом с мутантным белком р53. Tue, 01 Jan 2008 00:00:00 GMT http://dspace.nbuv.gov.ua:80/handle/123456789/139919 2008-01-01T00:00:00Z http://dspace.nbuv.gov.ua:80/handle/123456789/139917 HTERT gene expression levels and telomerase activity in drug resistant MCF-7 cells Sakin, V.; Eskiocak, U.; Kars, M.D.; Iseri, Ö.D.; Gunduz, U. Cancer cells and some highly proliferative normal cells can stabilize telomere lengths by telomerase, which adds hexameric repeats to the ends of linear chromosomes. In this study, the activity of telomerase reverse transcriptase (hTERT) and its gene expression levels were investigated in paclitaxel, docetaxel, vincristine and doxorubicin resistant human MCF-7 breast adenocarcinoma cells. Materials and Methods: Resistant cell lines were developed by stepwise selection of cells (MCF-7/S) in increasing doses of paclitaxel (MCF-7/Pac), docetaxel (MCF-7/Doc), vincristine (MCF-7/Vinc) and doxorubicin (MCF-7/Dox). Antiproliferative effects of anticancer drugs were evaluated by XTT assay and IC50 values for different drugs were determined from cell proliferation curves. Expression levels of hTERT gene in sensitive and resistant cells were analyzed by RT-PCR. TRAP-Silver Staining assay was used to evaluate telomerase activities in these cells. Results: When drug resistant and sensitive MCF-7 cells were compared no significant differences were observed in hTERT expression levels and telomerase enzyme activities. Conclusion: This report demonstrates that drug resistance developed against paclitaxel, docetaxel, vincristine and doxorubicin in MCF-7 cells is independent of the expression of hTERT gene and telomerase activity.; В опухолевых клетках, а также некоторых нормальных клетках с высоким пролиферативным потенциалом длина теломеров может стабилизироваться за счет фермента теломеразы, добавляющего гексамерные повторы к концам линейных хромосом. Цель: проанализировать активность обратной транскриптазы теломеразного комплекса и экспрессию гена теломеразы в клетках MCF-7 аденокарциномы молочной железы человека, устойчивых к паклитакселу, доцетакселу, винкристину и доксорубицину. Материалы и методы: сублинии клеток MCF-7, обладающих лекарственной резистентностью, были полу- MCF-7, обладающих лекарственной резистентностью, были полу -7, обладающих лекарственной резистентностью, были получены путем селекции исходных клеток при культивировании их в присутствии возрастающих доз паклитаксела (MCF-7/Pac), доцетаксела (MCF-7/Doc), винкристина (MCF-7/Vinc) и доксорубицина (MCF-7/Dox). Антипролиферативный эффект противоопухолевых препаратов определяли в ХТТ-тесте. Величины IC50 для различных препаратов определяли по кривым пролиферации клеток. Уровень экспрессии гена hTERT в чувствительных и резистентных клетках анализировали методом ОТ-ПЦР. Теломеразную активность определяли с помощью набора TRAPeze. Результаты: проанализированные резистентные линии клеток MCF-7 не отличались от исходной линии ни по уровню экспрессии гена hTERT, ни по уровню теломеразной активности. Выводы: развитие лекарственной резистентности к паклитакселу, доцетакселу, винкристину и доксорубицину в клетках MCF-7 не связано с изменениями экпрессии гена hTERT или уровня теломеразной активности в них. Tue, 01 Jan 2008 00:00:00 GMT http://dspace.nbuv.gov.ua:80/handle/123456789/139917 2008-01-01T00:00:00Z http://dspace.nbuv.gov.ua:80/handle/123456789/139916 Alterations of constitutive pericentromeric heterochromatin in lymphocytes of cancer patients and lymphocytes exposed to 5-azacytidine is associated with DNA-hypomethylation Shvachko, L.P. DNA hypomethylation plays a key role in carcinogenesis. The malignant transformation of cells as well as tumor progression is accompanied with increasing DNA hypomethylation in cancer cells. Nevertheless, the evolution of dis-epigenetic genomic alteration in the somatic cellular malignant transformation has not yet been clear. Aim: To study the relationship between the pattern of genomic DNA hypomethylation and DNA hyperploidy. Methods: The model of 5-azacytidine demethylating DNA treatment of the mitogen-stimulated lymphocytes in parallel with patients with solid cancer has been explored. DNA content was measured by quantitative DAPI and Hoechst 33258 fluorescence in situ hybridization on interphase nuclei. The conventional mitogen-stimulated blood lymphocyte culture development was performed in metaphase chromosomes and interphase nuclei assay. The light and fluorescent cytomorphological microscopy was performed. Results: The model 5-azacytidine induced DNA demethylation results in increased DNA hyperploidy accompanying major pericentromeric heterochromatin (Alu) DNA repeats amplification similar to those during DNA hypomethylation-associated cancer events, and both contributed to nuclear heteropycnosis development. The constitutive pericentromeric heterochromatin consequent morphological disturbance to the latent polytene chromomerization and heteropycnosis development both in cancer patients and in model 5-azacytidine exposured lymphocytes are associated whith DNA hypomethylation. Conclusion: We have observed that the induced global DNA hypomethylation triggers dis-epigenetic morphological reprogramming of constitutive pericentromeric heterochromatin on the extrachromosomal organization pathway as seen during the heterochromatin latent polytene features development, which is of importance as one of the mechanism involving DNA hypomethylation in initiation and progression of cancer.; ДНК-гипометилирование играет ключевую роль в канцерогенезе. Маллигнизация, как и прогрессия опухоли, сопровождается увеличением гипометилирования ДНК в опухолевых клетках. Тем не менее до сих пор вопросы эволюции дис-эпигенетических геномных изменений в соматической клеточной злокачественной трансформации, связанной с ДНК-гипометилированием, остаются невыясненными. Цель: исследовать взаимоотношения между характером геномного ДНК-гипометилирования и ДНК-гиперплоидностью. Методы: в модельной системе ДНК-деметилирования 5-азацитидином обрабатывали митогенстимулированные лимфоциты и лимфоциты периферической крови онкобольных с солидными опухолями. Содержание ДНК определялось на основе количественной DAPI и Hoechst 33258 флуоресценции интерфазных лимфоцитов. Фитогемагглютининстимулированная культура лимфоцитов использовалась для исследования метафазных хромосом и интерфазных ядер с помощью световой и флуоресцентной микроскопии. Результаты: модельное действие 5-азацитидина увеличивает соматическую ДНК-гиперплоидность, которая сопровождается направленной амплификацией основных перицентромерных Alu ДНК-повторов, подобно таковой при онкологическом процессе, ассоциированном с геномным гипометилированием, что вносит вклад в развитие ядерного гетеропикноза. Выводы: выявлено, что индуцированное глобальное гипометилирование ДНК запускает дис-эпигенетическое репрограммирование конститутивного перицентромерного гетерохроматина по пути экстрахромосомной организации, как показано в развитии латентной политении гетерохроматина, которая является одним из ключевых механизмов вовлечения гипометилирования в инициацию развития и прогрессию опухолей. Tue, 01 Jan 2008 00:00:00 GMT http://dspace.nbuv.gov.ua:80/handle/123456789/139916 2008-01-01T00:00:00Z