http://dspace.nbuv.gov.ua:80/handle/123456789/151248 2026-04-19T19:33:26Z http://dspace.nbuv.gov.ua:80/handle/123456789/152612 Glioma-associated protein CHI3L2 suppresses cells viability and induces G1/S transition arrest Avdieiev, S.S.; Gera, L.; Hodges, R.; Dmytrenko, V.V. Aim. To analyze the effect of the CHI3L2 protein on malignant and non-malignant cell viability, and determined the CHI3L2 impact on the cell cycle and signaling pathways involved in the cell cycle regulation. Methods. MTT-based cell proliferation assay, FACS, western blot analysis. Results. The CHI3L2 protein inhibits the glioma cells viability and potentiates the effect of anti-cancer cytotoxic agents. The CHI3L2 treatment results in the G1/S transition arrest. CHI3L2 provoked a dramatic reduction of pRB phosphorylation and a significant decrease in the cyclin D1 expression, whereas the p53 and p21 expression levels were substantially increased. Conclusions. The CHI3L2 protein, which is overexpressed in human gliomas, is a negative regulator of the glioma cells viability. The reduced cell viability after the CHI3L2 treatment could be due to the activation of pRB and p53 and the downregulation of cyclin D.; Мета. Проаналізувати життєздатність злоякісних та незлоякісних клітин за дії протеїна CHI3L2, а також визначити вплив CHI3L2 на клітинний цикл і сигнальні шляхи, залучені до його регуляції. Методи. МТТ–тест, проточна цитофлуориметрія, вестерн блот аналіз. Результати. CHI3L2 пригнічує життєздатність клітин гліоми людини і підсилює дію протиракових цитотоксичних агентів. CHI3L2 інгібує перехід клітин із G1- до S-фази клітинного циклу. CHI3L2 зумовлює зниження кількості фосфорильованої форми pRB, зменшення вмісту цикліну D1 та зростання вмісту p53 і p21. Висновки. CHI3L2, що надекспресується в гліомах людини, є негативним регулятором життєздатності клітин гліоми. Цитотоксичний вплив CHI3L2 може бути пов'язаним з активацією pRB та р53, а також зниженням вмісту цикліну D.; Цель. Проанализировать жизнеспособность злокачественных и незлокачественных клеток при воздействии протеина CHI3L2, а также определить влияние CHI3L2 на клеточный цикл и сигнальные пути, вовлеченные в его регуляцию. Методы. МТТ-тест, проточная цитофлуориметрия, вестерн блот анализ. Результаты. CHI3L2 подавляет жизнеспособность клеток глиомы человека и усиливает действие противораковых цитотоксических агентов. CHI3L2 ингибирует переход клеток с G1- в S-фазу клеточного цикла. Влияние CHI3L2 приводит к снижению количества фосфорилированной формы pRB, уменьшению содержания циклина D1 и увеличению содержания p53 и p21. Выводы. CHI3L2, оверэкспрессия которого характерна для глиом человека, является негативным регулятором жизнеспособности клеток глиомы. Цито­ток­си­чес­кое влияние CHI3L2 может быть связано с активацией pRB и р53, а также снижением содержания циклина D. 2015-01-01T00:00:00Z http://dspace.nbuv.gov.ua:80/handle/123456789/152569 CRISPR/Cas9 technology for targeted genome editing Lomov, N.A.; Borunova, V.V.; Rubtsov, M.A. CRISPRs (Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats) are the segments of prokaryotic DNA containing short repeats in its nucleotide sequence. Today we know that this is a bacterial protection system against viral DNA. The molecular components of CRISPR/Cas9 system have been used for a gene editing in eukaryotes since 2013. But as any other method it also has the limitations and drawbacks. Here we are going to review the history of CRISPR biology and to discuss the possibilities that this new technology provides to researchers as well as the prospects for its use in the medical research and treatment.; CRISPRs (Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats) – послідовності в геномі прокариот, які складаються з коротких повторів, що перемежовуються унікальними послідовностями. Це система бактеріальної захисту від вірусної ДНК. Молекулярні компоненти даної системи з 2013 року використовуються як інструмент редагування еукаріотічесого геному, хоча дана технологія і має деякі обмеження і недоліки. У даному огляді ми торкнемося історію застосування системи CRISPR / Cas9 і обговоримо можливості, які дана технологія надає для дослідження і лікування різних захворювань.; CRISPRs (Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats) – последовательности в геноме прокариот, которые состоят из коротких повторов, перемежающихся уникальными последовательностями. Это система бактериальной защиты от вирусной ДНК. Молекулярные компоненты данной системы с 2013 года используются как инструмент редактирования эукариотического генома, хотя данная технология и имеет некоторые ограничения и недостатки. В данном обзоре мы затронем историю применения системы CRISPR/Cas9 и обсудим возможности, которые данная технология предоставляет для исследования и лечения различных заболеваний. 2015-01-01T00:00:00Z http://dspace.nbuv.gov.ua:80/handle/123456789/152568 Autoantibodies against tyrosyl-tRNA synthetase and its separated domains at essential hypertension Grom, M.Yu.; Yakovenko, L.F.; Granich, V.M.; Dobrohod, A.S.; Torbas, O.O.; Radchenko, A.D.; Sirenko, Yu.M.; Sidorik, L.L.; Kornelyuk, A.I. In addition to the key role in biosynthesis some aminoacyl-tRNA synthetases provide non-canonical functions. Particularly, separated fragments of tyrosyl-tRNA synthetase (TyrRS) involved into angiogenesis and inflammation. Meanwhile, the vascular inflammation and endothelial dysfunction are central characteristics of the pathogenesis of essential hypertension (EH). The latest studies highlight a role of antibodies in physiopathology of EH. Aim. We had investigated the full-length TyrRS and its domains as autoantigens in sera of the persons with EH (n = 25), the healthy individuals with family history of the pathology (n = 12), and in the control group of healthy subjects (n = 32). Methods. The recombinant TyrRS and its separated domains coupled with His-tags and generated by Escherichia coli were purified by chromatography on Ni-NTA-agarose. The levels of specific autoantibodies (aAbs) in sera of volunteers were measured by ELISA and confirmed in an immunoblotting assay. Results. Some subjects with elevated levels of aAbs against the full-length enzyme were detected in the cohort studies. 52 % of the persons with EH as immunoreactive against miniTyrRS (p < < 0.001) and 50 % against CTD (p = 0.002) were identified. In 50 % of the healthy individuals with family history of EH (p = 0.037) the levels of anti-CTD aAbs were elevated. Conclusions.The increased levels of aAbs against miniTyrRS and CTD in sera of the persons with EH potentially may be used as a prognostic marker of the disease severity or therapy effectiveness. Moreover, the immunoreactivity of healthy individuals with family history of EH against CTD may be an early marker of hypertension.; Окрім ключової ролі у біосинтезі білка певні аміноацил-тРНК синтетази виконують також неканонічні функції. Зокрема окремі домени тирозил-тРНК синтетази залучені до ангіогенезу та запальних реакцій. Тим часом, судинні запалення і дисфункція ендотелію є центральними характеристиками патогенезу гіпертонічної хвороби (ГБ). Останні дослідження підкреслюють роль антитіл в патофізіології ГБ. Мета. Дослідити повнорозмірну TyrRS і її окремі домени як аутоантигени в сироватках осіб з ГБ (n = 25), у здорових осіб з сімейною історією патології (n = 12), і в контрольній групі здорових осіб (n = 32). Методи. Ре­ком­бінантна TyrRS і її окремі домени, пов'язані з His-теґами, експресувалися в клітинах E. coli, та очищалися хроматографією на Ni-NTA-агарозе. Рівні специфічних аутоантитіл (aAbs) в сироватці добровольців були виміряні методом ІФА та підтверджені в імуноблотингу. Результати.Некоторие пацієнти з підвищеним рівнем aAbs проти повнорозмірного ферменту були виявлені в когортних дослідженнях. 52 % осіб з ГБ були ідентифіковані як імунореактивні проти mi­niTyrRS (р < 0,001) і 50 % проти CTD (р = 0,002). У 50 % здорових осіб з сімейною історією ГБ (р = 0,037) рівні анти-CTD aAbs бу­ли підвищені. Висновки. Збільшення рівнів aAbs проти miniTyrRS і CTD у сироватці осіб з ГБ потенційно може бути використане як прогностичний маркер ступеня тяжкості захворювання та ефективності терапії. Крім того, імунореактивність проти CTD здорових людей з сімейною історією ГБ може бути раннім маркером гіпертонії.; Кроме ключевой роли в процессе биосинтеза белка ряд аминоацил-тРНК синтетаз также исполняют, так называемые, неканонические функции. В частности, отдельные домены тирозил-тРНК синтетазы вовлечены в ангиогенез и воспалительные реакции. Между тем, сосудистой воспаление и дисфункция эндотелия яв­ля­ются центральными характеристиками патогенеза гипер­тонической болезни (ГБ). Последние исследования подчеркивают роль антител в патофизиологии ГБ. Цель. Исследовать полноразмерную TyrRS и ее отдельные домены как аутоантигены в сыворотках лиц с ГБ (n = 25), у здоровых лиц с семейной историей патологии (n = 12), и в контрольной группе здоровых лиц (n = 32). Методы. Рекомбинантная TyrRS и ее отдельные домены, связанные с His-тегами и экспрессированные в E. coli, очищали хроматографией на Ni-NTA-агарозе. Уровни специфических аутоантител (aAbs) в сыворотке добровольцев были измерены методом ИФА и подтверждены в иммуноблоттинге. Результаты.Некоторые пациенты с повышенным уровнем aAbs против полноразмерного фермента были обнаружены в когортных исследованиях. 52 % лиц с ГБ были идентифицированы как иммунореактивные против miniTyrRS (р < 0,001) и 50 % против CTD (р = 0,002). У 50 % здоровых лиц с семейной историей ГБ (р = 0,037) уровни анти-CTD aAbs были повышены. Выводы. Увеличение уровней aAbs против miniTyrRS и CTD в сыворотке у лиц с ГБ потенциально может быть использовано в качестве прогностического маркера степени тяжести заболевания и эффективности терапии. Кроме того, иммунореактивность против CTD здоровых людей с семейной историей ГБ может быть ранним маркером гипертонии. 2015-01-01T00:00:00Z http://dspace.nbuv.gov.ua:80/handle/123456789/152567 Ultrastructural organization of replicating chromatin in prematurely condensed chromosomes Arifulin, E.A. Aim. The ultrastructural aspect of replicating chromatin organization is a matter of dispute. Here, we have analyzed the ultrastructural organization of replication foci using prematurely condensed chromosomes (PCC). Methods. To investigate the ultrastructure of replicating chromatin, we have used correlative light and electron microscopy as well as immunogold staining. Results. Replication in PCC occurs in the gaps between condensed chromatin domains. Using correlative light and electron microscopy, we observed that the replication foci contain decondensed chromatin as well as 80 and 130 nm globules, those were also found in condensed non-replicating chromatin domains. Using immunogolding, we demonstrated that DNA replication in S-phase PCC occurs in loose chromatin on the periphery of dense chromatin domains. Conclusion. Replication in PCC occurred in the decondensed chromatin neighboring the condensed chromatin without formation of special structures.; Мета. До цих пір немає єдиної думки про ультраструктурі реплицирующихся хроматину. Ми проаналізували ультраструктурну організацію Реплікаційний фокуса в клітках з передчасно конденсованими хромосомами (ПКХ). Методи. Для вивчення хроматину на ультраструктурному рівні використовували методи кореляційної електронної та світлової мікроскопії, а також іммуноголдінг. Результати. Було показано, що реплікація в ПКХ відбувається в проміжках між доменами конденсованого хроматину. C допомогою кореляційної мікроскопії було встановлено, що в Реплікаційний фокусах присутній деконденсірованний хроматин і глобули діаметром 80 і 130 нм, так само присутні в конденсованих нерепліцірующіхся хроматінових доменах. Більш того, за допомогою іммуноголдінга було показано, що реплікація ДНК в S-фазних ПКХ відбувається в пухкому хроматині на периферії щільних хроматінових доменів. Висновки. Реплікація в ПКХ відбувається в деконденсірованном хроматині сусідить з конденсованим хроматином без утворення спеціальних структур.; Цель. До сих пор нет единого мнения об ультраструктуре реплицирующегося хроматина. Мы проанализировали ультраструктурную организацию репликационного фокуса в клетках с преждевременно конденсированными хромосомами (ПКХ). Методы. Для изучения хроматина на ультраструктурном уровне использовали методы корреляционной электронной и световой микроскопии, а также иммуноголдинг. Результаты. Было показано, что репликация в ПКХ происходит в промежутках между доменами конденсированного хроматина. C помощью корреляционной микроскопии было установлено, что в репликационных фокусах присутствует деконденсированный хроматин и глобулы диаметром 80 и 130 нм, так же присутствующие в конденсированных нереплицирующихся хроматиновых доменах. Более то­го, с помощью иммуноголдинга было показано, что репликация ДНК в S-фазных ПКХ происходит в рыхлом хроматине на периферии плотных хроматиновых доменов. Выводы. Репликация в ПКХ происходит в деконденсированном хроматине соседствующем с конденсированным хро­матином без образования специальных структур. 2015-01-01T00:00:00Z