http://dspace.nbuv.gov.ua:80/handle/123456789/151028 2026-04-27T17:08:18Z http://dspace.nbuv.gov.ua:80/handle/123456789/155206 Чутливість гемопоетичних клітин ембріональної печінки людини до ВІЛ-інфекції Іванська, Н.В.; Лукаш, Л.Л.; Швед, А.Д.; Рибалко, С.Л.; Сухорада, О.М.; Жеребцова, Е.М.; Рубан, Т.О.; Подольська, С.В.; Кухаренко, О.П.; Грицак, Т.Ф.; Максименок, О.В. У роботі досліджено пермісивність та чутливість гемопоетичних клітин ембріональної печінки людини до інфікування ВІЛ-1. Показано, що інтактні клітини с високопермісивною системою для репродукції вірусу. У 23 зразках первинної популяції культивованих клітин рівень синтезу вірусних антигенів (р24) та титру інфекційного вірусу значно перевищував такі у стандартних клітинах Т4-лімфоми МТ-4. Проте у двох зразках ці показники виявилися значно нижчими. Отримані результати обговорюються з точки зору гіпотези про природну стійкість кров'яних клітин до ВІЛ-інфікування та можливості використання стовбурових клітин у дослідженнях ВІЛ-інфекції у медицині.; В работе изучали чувствительность гемопоэтичесшх клеток эмбриональной печени человека к ВИЧ-1. Показано, что интактные клетки являются высокопермиссивной системой для репродукции ретровируса. Почти во всех образцах эмбриональ­ных клеток уровень синтеза антигена р24 и титры инфекционного вируса превышали таковые в стандартных лимфоидных культурах МТ-4, однако в двух из 25 исследованных образцов эти показатели имели существенно меньшие значе­ния. Полученные данные обсуждаются с точки зрения гипоте­зы о природной устойчивости к ВИЧ и явления бессимптом­ных ВИЧ-инфекций. Рассматривается также применение эмбриональных и кордовых клеток для изучения ВИЧ-инфекции в медицине и биотехнологии.; We have studied permissivness of embryonic liver cells to HIV-1 infection. The data obtained on primary cultivated cell populations from 25 aborted embryos have shown those liver stem cells could be regarded as a highly permissive for HIV-1 infection and reproduction. The titers of infectious virus and its p24 antigen produced in native cells were substantially higher than that in standard culture of T4-lymphoma cells MT-4. We have not found HIV-resistan1 samples of embryonic liver cells, nevertheless two isolations of cell samples revealed by low permissivness contrary to the majority of cases. We suggest that these primary cells could be used as alternative to established ones, when the use of immortalized transformed cell lines (MT-4 or any other) is not desirable. The hypothesis of blood cell's native resistance to HIV infection is also discussed. 1997-01-01T00:00:00Z http://dspace.nbuv.gov.ua:80/handle/123456789/155205 Methylene blue: an alternative, multi-purpose stain for detection, analysis and isolation of nucleic acids Johnson, K.M.; Hanekamp, T.; Stayton, M.M. A series of experiments was performed utilizing Methylene Blue (MeB) in place of the intercalating dyes ethidium bromide (EtBr) and acridine orange (AO) to stain, visualize, and isolate DNA and RNA. MeB proved to be superior to the other dyes for several purposes: 1) visualization of glyoxalated (chemically denatured) RNA in agarose gels, 2) staining of nucleic acids that are to be used in subsequent hybridization experiments, and 3) isolation and purification of plasmid DNA by CsCl ultracentrifugation. MeB was found to perform at least as well as EtBr or AO for visualization of DNA in agarose of acrylamide gels, and DNA stained with MeB can be purified from agarose gel slices by the Gene Clean protocol. These results indicate that MeB is a very effective nucleic acid stain. Its safety versus conventional intercalating dyes will be discussed.; Здійснено серію експериментів з використання метиленового синього (МС) замість інтеркалюючих барвників бромистого етидію (ЕВ) та. акридинового оранжевого (АО) для забарвлен­ня, візуалізації та виділення ДНК і РНК. Показано, що МС переважає інші барвники у використанні для декількох цілей: 1) візуалізації гліоксильовано'і (хімічно денатурованої) РНК в агарозних гелях; 2) забарвлювання нуклеїнових кислот, які в подальшому будуть використані в експериментах з гібри­дизації; 3) виділення та очистки плазмідної ДНК ультрацентрифугуванням в CsCl. Знайдено, що за допомогою МС ДНК так само добре виявляється в гелях агарози або акриламіду, як і з використанням ЕВ і АО, а ДНК, забарвлена МС, може бути очищена із зрізів гелей агарози по протоколу «Gene Clean». Ці результати вказують на те, що МС є дуже ефективним барвником нуклеїнових кислот. Обговорюється його безпека іюрівняно з загальноприйнятними інтеркалюючими барвниками.; Проведена серия экспериментов по использованию метилено­вого синего (МС) вместо интеркалирующих красителей бромистого этидия (ЭВ) и акридинового оранжевого (АО) для окрашивания, визуализации и выделения ДНК и РНК. Показано, что МС превосходит другие красители в использовании для нескольких целей: 1) визуализации глиоксилированной (хи­мически денатурированной) РНК в агарозных гелях; 2) окрашивания нуклеиновых кислот, которые впоследствии будут использоваться в экспериментах по гибридизации; 3) выделе­ния и очистки плазмидной ДНК ультрацентрифугированием в CsCl. Обнаружено, что МС так же пригоден для визуализации ДНК в гелях агарозы или акриламида, как ЭВ или АО, а ДНК, окрашенная МС, может быть очищена из срезов гелей агарозы по протоколу «Gene Clean». Эти результаты указывают на то, что МС – очень эффективный краситель нуклеиновых кислот. Обсуждается его безопасность по сравнению с общепринятыми интеркалирующими красителями. 1997-01-01T00:00:00Z http://dspace.nbuv.gov.ua:80/handle/123456789/155204 Виявлення вірусу класичної чуми свиней за допомогою обернено-транскриптазної полімеразної ланцюгової реакції та молекулярної гібридизації Кириленко, С.Д.; Дерябін, О.М.; Дерябіна, О.Г.; Кириленко, О.Л.; Чередник, Ю.О.; Гришок, Л.П.; Шиков, О.Т. Для виявлення методом обернено-транскриптазної полімеразної ланцюгової реакції геномної РНК вірусу класичної чуми свиней (КЧС) у патматеріалах, отриманих від тварин з різним клінічним проявом та перебігом захворювання КЧС, було використано олігонуклеотидні затравки, що фланкують фрагмент (846 п. н.) гена структурного білка гп51–55 цього вірусу. Обговорюються можливості використання розроблених праймерів для диференціації високо- та низьковірулентних ізолятів вірусу КЧС та в проведенні молекулярно-епізоотичних досліджень.; Для выявления методом обратно-транскриптазной полиме­разной цепной реакции геномной РНК вируса классической чумы свиней (КЧС) в патматериалах, полученных от живо­тных с различными клиническими проявлениями и протекани­ем заболевания КЧС, использованы олигонуклеотидные за­травки, фланкирующие фрагмент (846 п. о.) гена структур­ного белка гп51-55 этого вируса- Обсуждаются возможности использования разработанных праймеров для дифференциации высоко- и низковирулентных изолятов вируса КЧС и в прове­дении молекулярно-эпизоотических исследований.; Oligonucleotide primers flanking 846 bp fragment of gp5l-55 structural gene of classical swine fever virus (CSFV) have been used in polymerase chain reaction for detection of genomic RNA of CSFV in pathological specimens taken from animals with different clinical signs and disease running. The possibility of their use in the differentiation of high- and low virulent CSFV isolates and in molecular epidemiologicat investigations is discussed. 1997-01-01T00:00:00Z http://dspace.nbuv.gov.ua:80/handle/123456789/155202 Прототропна таутомерія азотистих основ: новий погляд на стару проблему Говорун, Д.М. Підсумовуються результати циклу розрахунково-теоретичних досліджень фізико-хімінних зако­номірностей прототропної таутомерії нуклеотидних основ, виконаних у рамках напівемпіричного квантовохімічного методу AMI (режим оптимізації всіх структурних пара­метрів). Застосувавши нетрадиційний підхід, який грунтується на тому, що максимальна, чисельність сімейства прототропних таутомеріє основи визначається загальною кількістю протонів і вільних електронних пар атомів – акцепторів протона, вдалося встановити, що у відношенні прототропної таутомерії нуклеотидні основи є значно мобільнішими структурами (прототропна таутомерія нуклеотидних основ має молекулярно-цвітеріонний характер і відбувається за участю карбопротонів), аніж це вважалося раніше. Обговорюється біологічна, значущість отриманих результатів, які сформульовано максимально узагальнено і можуть бути розповсюджені, на думку автора, на значно ширше коло об'єктів, ніж канонічні нуклеотидні основи, їхні «складові частини» та продукти їхньої модифікації, зокрема дезамінування.; Подводятся итоги цикла расчетно-теоретических исследова­ ний, выполненных в рамках полу эмпирического квантовохими- ческого метода AMI, касающихся физико-химических законо­мерностей прототроппой таутомерии нуклеотидных основа­ний. Применив нетрадиционный подход, базирующийся на том, что максимальная численность семейства прототропных таутомеров основания определяется общим количеством протонов и иеподеленных электронных пар атомов – акцеп­торов протона, удалось установить, что в отношении про­тотропной таутомерии нуклеотидные основания представля­ют собой значительно более мобильные структуры (протот­ропная таутомерия нуклеотидных оснований имеет молеку­лярно-цвиттер ионный характер и происходит с участием карбопротонов), чем это было принято считать ранее. Об­суждается биологическая значимость полученных результа­тов, которые сформулированы в работе с максимально воз­можным обобщением и могут быть распространены, с точки зрения автора, на более широкий круг объектов, включая аминокислоты.; The summary is made of the scries of calculation-theoretical investigations fulfilled by the setniempirical quantum-chemical AMI method on physico-chemical features of prototropic tautomerism of nucleotide bases. Applying of non-traditional approach which is based on the view that highest possible numbers of prototropic tautomers of bases are determined by an overall Quantity of protons and electron lone pairs of proton acceptor atoms, the success was achieved in ascertaining that as regards prototropic tautomerism nudcotule bases are more mobile structures (prototropic tautomerism of nucleotide bases has a molecular-zwitterionic diameter involving carboprotons as well) than it was assumed earlier. A biological significance of the data obtained, which are generalized and may be extended from the autlwr's point of view to larmier range of objects, ammo acids included. 1997-01-01T00:00:00Z