http://dspace.nbuv.gov.ua:80/handle/123456789/150977 2026-04-18T21:25:44Z http://dspace.nbuv.gov.ua:80/handle/123456789/153054 Сравнительное изучение экспрессии модельного гена бактериальной β-галактозидазы в культуре фибробластов мыши и при прямом введении в печень животного Варзанова, И.С.; Неборачко, Л.Н.; Шпилевая, С.П.; Костецкий, И.Е.; Столяр, Т.В.; Сухорада, Е.М.; Лукаш, Л.Л.; Кордюм, В.А. На основе ДНК вируса гепатита В сконструирован вектор с модельным геном бактериальной β-галактозидазы. Показано отсутствие существенных отличий в уровне экспрессии гена LacZ Escherichia coli, находящегося под контролем промоторов HhsA вируса гепатита B и раннего промотора вируса SV40 в фибрболастах мыши (клетки Ltk). В то же время наблюдалась значительная разница в уровне экспрессии данного гена в составе вышеуказанных плазмид в клетках печени интактных мышей при введении генетического материала непосредственно в печень путем инъекции в составе липосом. Ген бактериальной галактозидазы, находящийся под контролем промотора гена поверхностного антигена вируса гепатита B, экспрессировался значительно эффективнее в этих клетках.; На основі ДНК вірусу гепатиту В сконструйовано вектор з модельним геном бактерійної β-галактозидази. Показано відсутність істотних відмінностей у рівні експресії гена LacZ Escherichia coli, що перебуває під контролем промоторів HhsA вірусу гепатиту B і раннього промотору вірусу SV40 у фібробластах миші (клітини Ltk). Водночас відмічено значну різницю у рівні експресії даного гена у складі вищезазначених плазмід у клітинах печінки інтактних мишей при введенні генетичного матеріалу безпосередньо в печінку шляхом ін'єкції у складі ліпосом. Ген бактерійної галактозидази, що перебуває під контролем промотору гена поверхневого антигену вірусу гепатиту B, експресується значно ефективніше у цих клітинах.; A vehicle with a model gene of the bacterial b-galactosidase has been constructed on the basis of DNA of hepatitis B virus. Comparative studies in the expression of E. coli lacZ gene under the control of promoters of hepatitis B virus and early promoter of SV40 virus in culture of murine fibroblasts (Ltk- cells) and in murine liver cells with immediate introduction of genetic material into liver by injection as part of liposomes have been conducted. The bacterial β-galactosidase gene under the control of promoter of surface antigen hepatitis B virus gene has been expressed much more efficiently in these cells. 1990-01-01T00:00:00Z http://dspace.nbuv.gov.ua:80/handle/123456789/153052 ДНК-диагностика и подходы к генной терапии наследственного дефицита α₁-антитрипсина Шварцман, А.Л.; Страхова, М.П.; Гайцхоки, В.С.; Бергер, В.; Кутель, Ч. Из библиотеки к ДНК печени человека на экспрессионном векторе λgt11 выделен ряд клонов, содержащих последовательности кДНК α₁-антитрипсина (AT). Анализ нуклеотидной последовательности полученных клонов показал, что в их составе отсутствуют последовательности (30–150) нуклеотидов, кодирующие 5'-конец мРНК AT. Объединением последовательностей к ДНК AT и последовательностей гена AT в уникальном Cfr10.1-сайте экзона II получена кДНК AT, включающая кодоны мРНК AT, начиная с позиции +2. Выделенная к ДНК AT использована для ДНК-диагностики наследственного дефицита AT в семьях носителей мутации в популяциях СССР и ГДР. Выявлено сцепление генотипа при наследственной недостаточности AT с отсутствием полиморфного MaeIIІ-сайта в экзоне III гена AT.; Із бібліотеки кДНК печінки людини на експресійному векторі λgt11 виділено низку клонів, що містять послідовності кДНК α₁-антитрипсину (AT). Аналіз нуклеотидної послідовності отриманих клонів показав, що в їхньому складі відсутні послідовності (30-150) нуклеотидів, які кодують 5'- кінець мРНК AT. Об'єднанням послідовностей кДНК AT і послідовностей гена AT в унікальному Cfr10.1-сайті екзона II одержано кДНК AT, що містить кодони мРНК AT, починаючи з позиції +2. Виділену кДНК AT використано для ДНК-діагностики спадкового дефіциту AT у сім'ях носіїв мутації в популяціях СРСР і НДР. Виявлено зчеплення генотипу при спадковій недостатності AT з відсутністю поліморфного MaeIIІ-сайта в екзоні III гена AT.; The recombinant clones synthesizing immunoreactive α₁-antitrypsin were isolated from expression library of human liver cDNA. Their sequencing has shown that they contain AT cDNAs lacking 20–100 codons from 5'terminal region of AT cRNA. These clones were used as probes for the diagnosis of inherited AT deficiency based on linked Maelll polymorphism. cDNA clones including all the codons for mature AT starting from +2 codon are obtained to construct bacterial strains-producents of AT as well as of recombinant DNAs necessary for gene therapy of AT deficiency. 1990-01-01T00:00:00Z http://dspace.nbuv.gov.ua:80/handle/123456789/153049 Изучение экспрессии экзогенного гена инсулина человека, находящегося под контролем регуляторной области гена hsp70 дрозофилы, в фибробластах человека Неборачко, Л.Н.; Лукаш, Л.Л.; Варзанова, И.С.; Кордюм, В.А. Сконструирован вектор, в котором ген инсулина человека находится под контролем регуляторной области гена hsp70 дрозофилы. Изучена экспрессия данного гена в фибробластах человека под действием теплового шока. Показано, что в ответ на тепловой шок наблюдается 4-кратное увеличение экспрессии гена инсулина человека.; Сконструйований вектор, у якому ген інсуліну людини знаходиться під контролем регуляторної області гена hsp70 дрозофіли. Вивчено експресію даного гена у фібробластах людини під дією теплового шоку. Показано, що у відповідь на тепловий шок спостерігається чотириразове підвищення експресії гена інсуліну людини.; A vehicle has been constructed where the human insulin gene is under control of the regulatory region of hspJO Dr. melanogaster gene. The expression of this gene in human fibroblasts under the effect of heat shock has been studied. It is shown that four-fold increase in the expression of the human insulin gene is observed in response to heat shock. 1990-01-01T00:00:00Z http://dspace.nbuv.gov.ua:80/handle/123456789/153032 ДНК-диагностика семейной гиперхолестеринемии Мандельштам, М.Ю.; Сасина, Л.К.; Шварцман, Л.А. Семейная гиперхолестеринемия (CF) – одно из наиболее часто встречающихся генетических заболеваний человека, связанное с мутациями в гене рецептора липопротеинов низкой плотности (рЛНП). ДНК-диагностика является не только наиболее достоверным методом определения CF, но и позволяет выявлять заболевание до возникновения клинических нарушений. В работе описано получение ДНК-зондов, необходимых для диагностики CF, на основе определения полиморфизмов длин рестрикционных фрагментов (ПДРФ) гена рЛНП. Рассматривается определение ПДРФ для PvuII, BstEII, Avail, NcoI, TaqI у больных с С Г как полезных маркеров в семейном анализе. Описан новый полиморфный вариант гена рЛНП для фермента EcoRI.; Сімейна гіперхолестеринемія (CF) – одне з найпоширеніших генетичних захворювань людини, пов'язане з мутаціями в гені рецептора ліпопротеїнів низької щільності (рЛНП). ДНК-діагностика є не лише найдостовірнішим методом визначення CF, але й дозволяє виявляти захворювання до виникнення клінічних порушень. Описано одержання ДНК-зондів, необхідних для діагностики CF, на основі визначення поліморфізмів довжин рестрикційних фрагментів (ПДРФ) гена рЛНП. Розглядається визначення ПДРФ для PvuII, BstEII, Avail, NcoI, TaqI у хворих з CF як корисних маркерів у сімейному аналізі. Описано новий поліморфний варіант гена рЛНП для ферменту EcoRI.; Familial hypercholesterolemia (FH) is one of the most common human genetic diseases. This inborn error of metabolism is connected with mutations in the low density lipoprotein receptor (LDLR) gene. DNA diagnostics is not only a method of the highest validity for FH determination, but also this method permits detecting the disease before the appearance of clinical disorders. The construction of DNA probes necessary for FH diagnostics based on determination of the LDLR gene restriction fragment length polymorphisms (RFLPs) has been described in the paper. The Pvull, BstEII, Avail, Ncol and Taql RFLPs are regarded to be helpful markers in FH family study. A new polymorphic variant of the LDLR gene for the enzyme EcoRl is described. 1990-01-01T00:00:00Z