http://dspace.nbuv.gov.ua:80/handle/123456789/133109 2026-04-19T08:12:06Z http://dspace.nbuv.gov.ua:80/handle/123456789/138951 Growth inhibition and apoptosis induced by 2 phenoxymethyl-3H-quinazolin-4-one in HL-60 leukemia cells Cipak, L.; Repicky, A.; Jantova, S. Aim: The aim of the study was to investigate anticancer activity of newly synthesized 2-phenoxymethyl-3H-quinazolin-4-one (PMQ). Materials and Methods: Anticancer activity of PMQ was studied towards human HL-60 leukemia cells. Antiproliferative activity of PMQ was determined by direct counting of cells using trypan blue staining technique. Apoptosis and cell cycle profile changes were analysed using internucleosomal DNA fragmentation assay and flow cytometry. Activation of caspases and changes in glutathione level were monitored using colorimetric or luminiscent methods. Results: PMQ induced concentration-dependent cytotoxicity in leukemia cells, with IC50 of 10.8 ± 0.9 µM. DNA flow cytometry analysis and DNA ladder formation assay indicated that PMQ actively induced apoptosis of cells accompanied by a block of cells in G2/M phase and a marked loss of cells in G0/G1 and S phases. Additionally, the activities of caspase-3 and caspase-9 were increased significantly and a markedly increased level of oxidized glutahione was observed. Inhibition of glutahione synthesis using buthionine sulfoximine sensitized leukemia cells to PMQ, confirming the involvement of ROS in PMQ-induced apoptosis. Conclusion: The results of this study clearly demonstrate that PMQ is a promising anticancer drug showing cytostatic and apoptotic effects toward HL-60 leukemia cells mainly through mitochondrial/caspase-9 dependent pathway.; Цель: изучить антипролиферативную активность нового синтезированного 2-феноксиметил-3Н-хиназолин-4-она (PMQ). Материалы и методы: антипролиферативную активность PMQ определяли по отношению к клеткам лейкоза линии HL-60 в тесте с трипановым синим при стандартном подсчете клеток. Апоптоз и клеточный цикл оценивали с помощью проточной цитометрии и анализа фрагментации внутриядерной ДНК. Активацию каспаз и изменения уровня глутатиона определяли колориметрическими или люминисцентными методами. Результаты: PMQ индуцирует дозозависимую цитотоксичность в клетках линии HL-60 (IC50 при 10,8 ± 0,9 μM). При проведении анализа ДНК с применением проточной цитометрии и определением формирования апоптической лестницы было показано, что PMQ активно индуцирует апоптоз и блокаду клеточного цикла в G2 /M фазе митоза и выраженной потерей клеток в G0 /G1 и S фазах. Кроме того, была достоверно повышена активность каспазы-3 и -9 и выраженно увеличен уровень окисленного глутатиона. Применение бутионин сульфоксимина привело к угнетению синтеза глутатиона и повышению чувствительности клеток HL-60 к PMQ, что подтверждает факт участия РФК в PMQ-индуцированном апоптозе. Выводы: PMQ проявил себя как потенциальное противоопухолевое средство против клеток лейкоза человека HL-60 с выраженным цитостатическим и проапоптическим действием. 2007-01-01T00:00:00Z http://dspace.nbuv.gov.ua:80/handle/123456789/138568 E-cadherin adhesion molecule and syndecan-1 expression in various thyroid pathologies Mitselou, A.; Ioachim, E.; Peschos, D.; Charalabopoulos, K.; Michael, M.; Agnantis, N.J.; Vougiouklakis, T. Cadherins and syndecans are transmembrane glycoproteins implicated in cell-cell and cell-matrix adhesion. Impairment of cadherin and syndecan mediated adhesion is likely to constitute one of the main factors leading to the reduced cell-cell and cell-matrix adhesion characteristics of tumor cells and play a pivotal role in the acquisition of invasive and metastatic proprieties by neoplastic epithelial cells. Aim: To elucidate the role and alterations of syndecan-1 expression in comparison with those of E-cadherin in normal and pathological thyroid glands (TG). Methods: A total of 55 TG carcinomas, 40 TG adenomas, 40 cases of hyperplastic TG disorders and 20 cases of normal TG autopsy samples, were evaluated by immunohistochemistry. The staining intensity, and localization of syndecan-1 and E-cadherin in sequential sections were examined, and semi-quantified. Results: Immunostaining of syndecan-1 and E-cadherin was strong in normal follicular TG epithelial cells, and located mainly in basolateral membrane. No significant change was seen in either molecule in hyperplastic TG disorders compared with TG adenomas. A significant reduction in expression of both syndecan-1 and E-cadherin was seen in well-differentiated TG carcinomas as compared with normal TG epithelium (p = 0.0001 and p = 0.032, respectively). Similarly, there was a significant reduction of both molecules expression in poorly differentiated and anaplastic TG carcinomas compared to well differentiated tumors (syndecan-1: p = 0.0037; and E-cadherin: p = 0.075). Conclusion: Decreased E-cadherin and syndecan-1 expression along with decreasing cellular differentiation may be involved in the complex mechanism of progression of TG pathology.; Кадгерины и синдеканы — это трансмембранные гликопротеины, участвующие в межклеточной адгезии и адгезии клеток к матриксу. Изменения экспрессии этих молекул играют главную роль в приобретении инвазивного и метастатического потенциала злокачественно трансформированными эпителиальными клетками. Цель: оценка роли экспрессии синдекана-1 и Е-кадгерина в ткани щитовидной железы в норме и при патологии. Методы: образцы ткани для иммуногистохимического исследования взяли у 55 больных раком щитовидной железы (ЩЖ), 40 пациентов — с аденомой ЩЖ, 40 — с гиперпластическими процессами ЩЖ, контролем служили 20 образцов неизмененной ткани ЩЖ (аутопсия). Результаты: экспрессия синдекана-1 и Е-кадгерина в нормальных фолликулярных эпителиальных клетках ЩЖ выражена интенсивно, с преимущественной локализацией в базолатеральной мембране. Не отмечали существенных различий в экспрессии обеих молекул при гиперпластических процессах по сравнению с аденомами ЩЖ. Однако таковая значительно снижена в образцах высокодифференцированной карциномы по сравнению с нормальным эпителием ЩЖ (p = 0,0001 и p = 0,032 соответственно), а также при низкодифференцированном и анапластическом раке по сравнению с высокодифференцированными опухолями ЩЖ (p = 0,0037 для синдекана-1 и p = 0,075 для Е-кадгерина). Выводы: снижение экспрессии синдекана-1 и Е-кадгерина, сопровождающееся снижением способности клеток к дифференциации, может быть частью механизма прогрессирования заболеваний ЩЖ. 2007-01-01T00:00:00Z http://dspace.nbuv.gov.ua:80/handle/123456789/138567 Expression of membrane-anchored matrix metalloproteinase inhibitor reversion inducing cysteine rich protein with kazal motifs in murine cell lines Takagi, S.; Hoshino, Y.; Osaki, T.; Okumura, M.; Fuginaga, T. Aim: It has been demonstrated that the endogenous matrix metalloproteinases (MMPs) inhibitor reversion inducing cysteine rich protein with Kazal motifs (RECK) is a reliable prognostic marker for detecting several types of tumors. However, the RECK expressions in most of the normal and neoplastic tissues were extremely low, and to measure its expression is quite complicated. The purpose of the present study is to establish an easy method to quantify murine RECK mRNA expression for use in future experimental studies. Subsequently, in order to verify the reliability of the established quantification technique, we examined the change in RECK expression and gelatinase secretion in tumor cells when stimulated by the extracellular matrix. Methods: Several murine tumor cells were used in the present study. The real-time polymerase chain reaction (PCR) method and measurement conditions for murine RECK mRNA were studied using these tumor cells. Gelatinase activities were also examined by gelatin zymography. Results: Murine RECK mRNA expression was accurately quantified using real-time PCR. Among the tumor cells used in the study, osteosarcoma cells showed significantly higher RECK mRNA expression than the others. The RECK expression in the osteosarcoma cells was down-regulated by contact with matrigel-coated culture flasks due to increased secretion of gelatinases. Conclusion: The real-time PCR method employed in our study is useful to quantify RECK expression.; Показано, что эндогенный ингибитор матриксных протеиназ (MMП) RECK может служить надежным прогностическим маркером для некоторых типов опухолей, однако его экспрессия в большинстве нормальных и неопластических тканей крайне низкая, поэтому возникают сложности, связанные с детекцией таковой. Цель работы — разработка количественного метода определения экспрессии мРНК для использования в экспериментальных исследованиях. Для дальнейшего подтверждения надежности разработанного метода исследованы изменения экспрессии RECK и секреции желатиназ в опухолевых клетках при стимуляции внеклеточным матриксом. Методы: в работе использовали несколько линий опухолевых клеток мыши, в которых экспрессию мРНК RECK анализировали методом ПЦР в режиме реального времени, активность желатиназ — методом зимографии. Результаты: экспрессию мРНК RECK количественно оценили методом ПЦР в режиме реального времени, причем среди исследованных клеточных линий наиболее высокий уровень экспрессии RECK выявили в клетках остеосаркомы. Экспрессия RECK в клетках остеосаркомы подавлялась при контакте с культуральным пластиком, обработанным матригелем, вследствие повышения секреции желатиназ. Выводы: для количественной оценки экспрессии мРНК RECK может быть использован метод ПЦР в режиме реального времени. 2007-01-01T00:00:00Z http://dspace.nbuv.gov.ua:80/handle/123456789/138566 The influence of psychoemotional status on metastasis of lewis lung carcinoma and hepatocarcinoma-29 in mice of C57BL/6J and CBA/LAC strains Kudryavtseva, N.N.; Tenditnik, M.V.; Nikolin, V.P.; Popova, N.A.; Kaledin, V.I. Aim: To study the influence of psychoemotional status on the development of experimental lung metastases of strain-specific murine Lewis lung carcinoma in C57BL/6J mice and hepatocarcinoma-29 in CBA/Lac male mice. Materials and Methods: Sensory contact model was used for generating animals with repeated experience of social victories or defeat in daily agonistic interactions. Tumor cells were injected into the tail vein after 20 days of agressive confrontations and the number of metastases in the lung was calculated 16 days later. Results: The experimental metastasis is shown to develop differently in mice with opposing social experience: the winners of both strains had significantly less metastases in the lung than the losers. Conclusion: The results obtained indicate that psychoemotional status affects Lewis lung carcinoma and hepatocarcinoma-29 metastasis in male mice.; Цель работы — исследование влияния психоэмоционального состояния на метастазирование линейноспецифических опухолей — карциномы легкого Льюис у мышей линии C57BL/6J и гепатокарциномы-29 у мышей линии CBA/Lac. Материалы и методы: для получения самцов мышей с повторным опытом социальных побед и поражений в ежедневных агрессивных взаимодействиях была использована модель сенсорного контакта (на протяжении 20 дней). Клетки опухолей вводили в хвостовую вену животных. Количество метастазов в легких подсчитывали через 16 дней после перевивки опухоли. Результаты: показано, что метастазирование в легкие протекает неодинаково у мышей с различным психоэмоциональным состоянием: у мышей с опытом побед обеих линий количество метастазов в легких было существенно меньше, чем у животных с опытом психоэмоциональных поражений. Выводы: психоэмоциональное состояние влияет на процессы метастазирования карциномы легкого Льюис и гепатокарциномы-29 у самцов мышей линий C57BL/6J и CBA/Lac. 2007-01-01T00:00:00Z