http://dspace.nbuv.gov.ua:80/handle/123456789/151242 2026-04-21T01:18:41Z 2026-04-21T01:18:41Z El'skaya, A.V. http://dspace.nbuv.gov.ua:80/handle/123456789/154597 2019-06-15T22:31:39Z 2014-01-01T00:00:00Z

In memoriam: Vadym M. Kavsan (1939–2014) El'skaya, A.V.

2014-01-01T00:00:00Z Morderer, D.Ye. Rymarenko, O.V. Skrypkina, I.Ya. Rynditch, A.V. http://dspace.nbuv.gov.ua:80/handle/123456789/154596 2019-06-15T22:32:23Z 2014-01-01T00:00:00Z

Ca²⁺ does not affect the binding properties of ITSN1 EH domains Morderer, D.Ye.; Rymarenko, O.V.; Skrypkina, I.Ya.; Rynditch, A.V. ITSN1 is an endocytic scaffold protein implicated in synaptic functioning. Ca²⁺ is known to be important for endo- cytosis in both pre- and post-synaptic terminals. ITSN1 contains two EH (Eps15 homology) domains which possess putative Ca²⁺-binding EF-hand motifs. Aim. To test the effect of Ca²⁺ on the EH domain binding properties. Methods. His-tag pulldown, Western blotting. Results. Addition of 1.5 mM Ca²⁺ does not affect the binding of the ITSN1 EH domains to the C-terminal fragment of the endocytic protein Epsin 1. Conclusions. The data obtained indicate that Ca²⁺ has no effect on the binding properties of the ITSN1 EH domains.; ITSN1 – адаптерний білок ендоцитозу, залучений до функціонування синапсів. Відомо, що іони Ca²⁺ є важливими для ендоцитозу у пре- та постсинаптичних закінченнях. ITSN1 має два ЕН-домени, гомологічних Eps15, які містять передбачені Ca²⁺-зв’язувальні мотиви EF-hand. Мета. Перевірити ефект іонів Ca²⁺ на зв’язувальні властивості доменів ЕН. Методи. Преципітація білків, злитих з His-тагом, Вестерн-блот-гібридизація. Результати. Показано, що додавання 1,5 мМ Ca²⁺ не впливає на зв’язування ЕН-доменами ITSN1 С-кінцевого фрагмента білка ендоцитозу Епсину 1. Висновки. Отримані дані свідчать про відсутність ефекту іонів Ca²⁺ на зв’язувальні властивості ЕН-доменів ITSN1.; ITSN1 – адапторный белок эндоцитоза, вовлеченный в функционирование синапсов. Известно, что ионы Ca²⁺ важны для эндоцитоза в пре- и постсинаптических окончаниях. ITSN1 имеет два ЕН-домена, гомологичных Eps15, которые содержат предсказанные Ca²⁺-связывающие мотивы EF-hand. Цель. Проверить эффект ионов Ca²⁺ на связывающие свойства доменов ЕН. Методы. Преципитация белков, слитых с His-тагом, Вестерн-блот- гибридизация. Результаты. Показано, что добавление 1,5 мМ Ca²⁺ не влияет на связывание ЕН-доменами ITSN1 С-концевого фрагмента белка эндоцитоза Эпсина 1. Выводы. Полученные данные свидетельствуют об отсутствии эффекта ионов Ca²⁺+ на связывающие свойства ЕН-доменов ITSN1.

2014-01-01T00:00:00Z Shalak, V.F. Vislovukh, A.A. Novosylna, O.V. Khoruzhenko, A.I. Kovalenko, M.I. Kolesanova, E.F. Egorova, E.A. Mishin, A.A. Krotevych, M.S. Skoroda, L.V. Negrutskii, B.S. http://dspace.nbuv.gov.ua:80/handle/123456789/154594 2019-06-15T22:31:38Z 2014-01-01T00:00:00Z

Characterization of novel peptide-specific antibodies against the translation elongation factor eEF1A2 and their application for cancer research Shalak, V.F.; Vislovukh, A.A.; Novosylna, O.V.; Khoruzhenko, A.I.; Kovalenko, M.I.; Kolesanova, E.F.; Egorova, E.A.; Mishin, A.A.; Krotevych, M.S.; Skoroda, L.V.; Negrutskii, B.S. Aim. We intend to characterize the new peptide-specific antibodies against the isoform 2 of translation elongation factor 1A (eEF1A2) and determine its presence in the postoperative samples of human breast, lung and stomach tumor tissues. Methods. The analysis of antibody specificity was performed by enzyme-linked immunosorbent assay, immunoblotting and immunohistochemistry. Immunoblotting and immunohistochemistry were used for the determination of the eEF1A2 in the human tumor samples, as well as in the samples of normal tissues surrounding tumors. Results. The antibodies obtained against the eEF1A2 specifically recognized this protein in the cell extracts and histological sections and did not cross-react with the elongation factor 1A isoform 1. eEF1A2 was revealed in the postoperative samples of breast, lung and stomach tumors as well as in the putative normal tissues surrounding tumors. Conclusions. The antibodies obtained against eEF1A2 are highly specific for the antigen and can be used for the immunological studies of tumors.; Мета. Охарактеризувати особливості нових пептидоспецифічних антитіл проти другої ізоформи фактора елонгації трансляції 1А (eEF1A2). Визначити присутність цієї ізоформи у післяопераційних зразках пухлин молочної залози, легенів, шлунку людини і порівняти із зразками умовної норми відповідних тканин. Методи. Специфічність антитіл аналізували методами імуноферментного аналізу, імуноблотингу та імуногістохімії. Iмуноблотинг та iмуногiстохімію використано для визначення eEF1A2 в зразках пухлин людини, а також умовної норми. Результати. Встановлено, що отримані антитіла проти eEF1A2 специфічно розпізнають зазначений білок в екстрактах та на гістологічних зрізах і не виявляють перехресної взаємодії з першою ізоформою фактора елонгації. Визначено, що фактор eEF1A2 присутній в післяопераційних зразках пухлин молочної залози, легенів і шлунку, а також в умовно нормальних зразках цих тканин. Висновки. Нами одержано високоспецифічні антитіла проти eEF1A2, які можна використовувати в імунологічних дослідженнях зразків пухлин.; Цель. Охарактеризовать особенности новых пептидоспецифических антител против второй изоформы фактора элонгации трансляции 1А (eEF1A2). Определить наличие этой изоформы в послеоперационных образцах опухолей молочной железы, легких, желудка человека и сравнить с условной нормой соответствующих тканей. Методы. Специфичность антител анализировали методами иммуноферментного анализа, иммуноблотинга и иммуногистохимии. Методы иммуноблоттинга и иммуногистохимии использовали для определения eEF1A2 в образцах опухолей человека, а также условной нормы. Результаты. Установлено, что полученные антитела против eEF1A2 специфически распознают этот белок в экстрактах и на гистологических срезах и не выявляют перекрестного взаимодействия с первой изоформой фактора элонгации. Мы определили, что фактор eEF1A2 присутствует в послеоперационных образцах молочной железы, легких и желудка, а также в условно нормальных образцах этих тканей. Выводы. Полученные нами антитела против eEF1A2 являются высокоспецифическими по отношению к антигену и могут быть использованы в иммунологических исследованиях опухолей.

2014-01-01T00:00:00Z Kotsarenko, K.V. Lylo, V.V. Ruban, T.P. Macewicz, L.L. Kornelyuk, A.I. Chernykh, S.I. Lukash, L.L. http://dspace.nbuv.gov.ua:80/handle/123456789/154591 2019-06-15T22:32:02Z 2014-01-01T00:00:00Z

Influence of EMAP II, IFN-α2b and its medicinal preparations on the MGMT protein amount in human cells in vitro Kotsarenko, K.V.; Lylo, V.V.; Ruban, T.P.; Macewicz, L.L.; Kornelyuk, A.I.; Chernykh, S.I.; Lukash, L.L. Aim. To study the effect of EMAP II, IFN-α2b and its medicinal preparations on the amount of O6-methylguanine-DNA methyltransferase (MGMT) protein in human cells in vitro. Methods. The human cells of 4BL and Hep-2 lines were treated with the purified recombinant proteins EMAP II, IFN-α2b and its commercial me dicinal preparations. Changes in the MGMT gene expression were studied at a protein level by Western blot analysis. Results. Treatment of Hep-2 and 4BL cells with EMAP II at the concentrations of 0.02 mg/ml and 2 mg/ml respectively led to induction of the MGMT gene expression. EMAP II at the concentrations of 0.2–20 g/ml caused decrease of the MGMT protein amount in Hep-2 cells. The regulating activity of EMAP II was also observed for MARP (anti-Methyltransferase Antibody Recognizable Protein). IFN-α2b and Laferon-PharmBiotek with the activity of 200 and 2000 IU/ml were shown to cause an increase of the MGMT protein amount in Hep-2 cells. Conclusions. The purified recombinant proteins EMAP II and IFN-α2b which are substrates for the medicinal preparations influenced on the amount of MGMT protein in the human cell cultures in a concentration-dependent manner. At the same time the effect of medicinal preparations differs from that of the purified protein IFN-α2b. Possibly it depends on the presence of stabilizing components in their compositions.; Мета. Дослідити вплив EMAP II, IFN-α2b та його медичних препаратів на кількість білка MGMT у клітинах людини in vitro. Методи. Клітини людини 4BL і Hep-2 обробляли EMAP II, IFN-α2b і його комерційними препаратами. Зміни в експресії гена MGMT на рівні білка досліджували за використання Вестерн-блот аналізу. Результати. Обробка клітин Hep-2 і 4BL цитокіном EMAP II в концентрації 0,02 і 2 мкг/мл відповідно призводить до індукції експресії гена MGMT. EMAP II в концентраціях 0,2–20 мкг/мл знижує кількість білка MGMT у клітинах Hep-2. Регулювальну активність EMAP II спостерігали також і відносно MARP (білка, який розпізнається моноклональними анти-MGMT антитілами). Показано, що IFN-α2b і Лаферон-ФармБіотек з активністю 200 і 2000 МО/мл підвищують кількість білка MGMT у клітинах Hep-2. Висновки. Очищені рекомбінантні білки EMAP II і IFN-α2b, які є субстратами для медичних препаратів, впливають на кількість білка MGMT у клітинах людини in vitro залежно від концентрації. У той же час дія медичних препаратів відрізняється від ефекту очищеного білка IFN-α2b, що, можливо, пов’язано з присутністю стабілізувальних компонентів у його складі.; Цель. Исследовать влияние EMAP II, IFN-α2b и его медицинских препаратов на количество белка MGMT в клетках человека in vitro. Методы. Клетки человека 4BL и Hep-2 обрабатывали EMAP II, IFN-α2b и его коммерческими препаратами. Изменения в экспрессии гена MGMT исследовали с использованием Вестерн-блот анализа. Результаты. Обработка клеток Hep-2 и 4BL цитокином EMAP II в концентрации 0,02 и 2 мкг/мл соответственно приводит к индукции экспрессии гена MGMT. EMAP II в концентрациях 0,2–20 мкг/мл снижает уровень экспрессии гена MGMT в клетках Hep-2. Регулирующую активность EMAP II наблюдали также и относительно MARP (белка, распознаваемого моноклональными анти-MGMT антителами). Показано, что IFN-α2b и Лаферон-ФармБиотек с активностью 200 и 2000 МЕ/мл повышают количество белка MGMT в клетках Hep-2. Выводы. Очищенные рекомбинантные белки EMAP II и IFN-α2b, являющиеся субстратами для медицинских препаратов, влияют на количество белка MGMT в клетках человека in vitro зависимым от концентрации образом. В то же время действие медицинских препаратов отличается от влияния очищенного белка IFN-α2b, что, возможно, связано с присутствием стабилизирующих компонентов в его составе.

2014-01-01T00:00:00Z