Production of human interferon alfa 2b in plants of Nicotiana excelsior by Agrobacterium-mediated transient expression

Abstract

Human interferon α2b gene was transiently expressed in Nicotiana excelsior plants. Fusion with N. plumbaginifolia calreticulin signal peptide for improved apoplast targeting and carrying out the expression under optimized conditions resulted in maximal interferon activity of 3.2 • 10³ IU/g fresh weight (FW) with an average of 2.1 ± 0.8 • 10³ IU/g FW. It proves that N. excelsior is a suitable host for Agrobacterium-mediated transient expression of genes encoding physiologically active human proteins. The transient expression conditions optimized for GFP marker protein were confirmed to be preferable for hIFN α2b.

Ген интерферона α2b был транзиентно экспрессирован в растениях Nicotiana excelsior. Слияние целевого гена с последовательностью калретикулинового сигнального пептида из N. plumbaginifolia для улучшения транспорта продукта в апопласт и проведения транзиентной экспрессии в оптимальных условиях позволило добиться максимальной активности интерферона в листьях 3.2 • 10³ МЕ/г сырой массы при среднем значении 2.1 ± 0.8 • 10³ МЕ/г. Полученные результаты свидетельствуют о возможности использования N. excelsior для Agrobacterium-опосредованной транзиентной экспрессии фармацевтически активных белков человека. Показано, что условия транзиентной экспрессии, оптимизированные для получения репортерного белка GFP, подходят также для экспрессии гена интерферона α2b человека.

Ген інтерферону α2b було транзієнтно експресовано у рослинах Nіcotіana excelsіor. Злиття цільового гена з послідовністю калретикулинового сигнального пептиду з N. plumbagіnіfolіa для поліпшення транспорту продукту в апопласт і проведення транзієнтної експресії в оптимальних умовах дозволило добитися максимальної активності інтерферону в листях 3.2 • 10³ МО/г сирої маси при середньому значенні 2.1 ± 0.8 • 10³ МО/г с.в. Отримані результати свідчать про можливість використання N. excelsіor для Agrobacterіum-опосередкованої транзієнтної експресії фармацевтично активних білків людини. Було показано, що умови транзієнтної експресії, оптимізовані для отримання репортерного білка GFP, підходять також для експресії гена інтерферону α2b людини.