Overexpression of adaptor protein Ruk/CIN85 in mouse breast adenocarcinoma 4T1 cells induces an increased migration rate and invasion potential

Abstract

Aim. To study the effect of adaptor protein Ruk/CIN85 overexpression on the dynamics of migration and Matrigel invasion as well as transendothelial migration of murine 4T1 breast adenocarcinoma cells. Methods. Dynamics of 4T1 cells migration/invasion was monitored in real time using the xCELLigence Real-Time Cell Analyzer (RTCA) DP Instrument equipped with a CIM-plate 16. Transendothelial migration (TEM) of 4T1 cells was performed through the layer of primary mouse lung endothelial cells seeded on gelatin-coated 24-well transwell inserts (8-μm pores).The two-tailed Student’s t-test for unequal variances was used for statistical analysis. Results. Ruk/CIN85-overexpression in 4T1 cells are indices a significantly increased motility, Matrigel invasiveness and migration through endothelial cells layer. Conclusions. The Ruk/CIN85 adaptor protein may play a potential role in the control of metastasis in vivo.

Мета. Дослідити вплив надекспресії адаптерного протеїну Ruk/CIN85 на динаміку міграції й інвазії через Матригель, а також на ефективність трансендотеліальної міграції клітин аденокарциноми молочної залози миші лінії 4Т1. Методи. Динаміку міграції/інвазії клітин 4Т1 аналізували в режимі реального часу за допомогою приладу XCELLigence Real-Time Cell Analyzer (RTCA) DP Instrument, оснащеного імпедансним планшетом CIM-plate 16. Трансендотеліальну міграцію (ТЕМ) клітин 4Т1 здійснювали через шар первинних ендотеліоцитів легені миші, висіяних на мембрану (розмір пор 8 μм) камери Бойдена. Для статистичного аналізу використовували двовибірковий t-тест Ст’юдента для незалежних вибірок з нерівними дисперсіями. Результати. Встановлено, що надекспресія Ruk/CIN85 у клітинах лінії 4Т1 супроводжується значним зростанням рухливості, здатності до інвазії через Матригель та шар ендотеліальних клітин. Висновки. Отримані результати вказують на потенційну роль адаптерного протеїну Ruk/CIN85 у контролі метастазування in vivo.

Цель. Исследовать влияние сверхэкспрессии адаптерного протеина Ruk/CIN85 на динамику миграции и инвазии через Матригель, а также на эффективность трансэндотелиальной миграции клеток аденокарциномы молочной железы мыши линии 4Т1. Методы. Динамику миграции/инвазии клеток 4Т1 анализировали в режиме реального времени с помощью прибора XCELLigence Real-Time Cell Analyzer (RTCA) DP Instrument, оснащенного импедансным планшетом CIM-plate 16. Трансэндотелиальную миграцию (ТЭМ) клеток 4Т1 осуществляли через слой первичных эндотелиоцитов легкого мыши, высеянных на мембрану (размер пор 8 μм) камеры Бойдена. Для статистического анализа использовали двухвыборочный t-тест Стьюдента для независимых выборок с неравными дисперсиями. Результаты. Установлено, что сверхэкспрессия адаптерного протеина Ruk/CIN85 в клетках линии 4Т1 сопровождается значительным ростом подвижности, способности к инвазии через Матригель и слой эндотелиальных клеток. Выводы. Полученные результаты указывают на потенциальную роль адаптерного протеина Ruk/CIN85 в контроле метастазирования in vivo.