Властивості високомолекулярної АТР-залежної протеїнази з еритроїдних клітин поросят

Abstract

Представлены результаты исследований свойств высокомоле­кулярной АТР-зависимой протеиназы, выделенной из эритро­идных клеток крови поросят раннего возраста. Молекулярная масса протеиназы составляет 700 ± 50 кДа, наивысшая актив­ность проявляется при рН 8,5. Активность фермента снижа­ется под влиянием ингибиторов сериновых и цистеиновых протеиназ и возрастает в присутствии додецилсульфата натрия и линолевой кислоты. Активность протеиназы дости­ гает высокого урвня в пролиферирующих эритробластах кос­тного мозга и уменьшается при созревании эритроидных клеток. В эритроидных клетках новоржденных и 30-суточных поросят активность протеиназы более высокая, чем в клет­ках 5–10-суточных животных. Обсуждается роль высокомолекулярной АТР-зависимой протеиназы в функциональной ак­тивности эритроидных клеток.

Представлено результати досліджень властивостей высокомолекулярно! АТР-залежної протеїна­зи, виділеної з еритроїдних клітин крові поросят раннього віку. Молекулярна маса протеїнази становить 700±50 кДа, найвища активність виявляється при рН 8,5. Активність ферменту знижується під впливом інгібіторів серинових і цистеїнових протеїназ та підвищується за присутності додецилсульфату натрію і лінолевої кислоти. Активність протеїнази досягає високого рівня в проліферуючих еритробластах кісткового мозку та зменшується при дозріванні еритроїдних клітин. В еритроїдних клітинах новонароджених і 30-добових поросят активність протеїнази є вищою, ніж у клітинах 5–10-добових тварин. Обговорюється роль високомолекулярної АТР-залежної протеїнази у функціональній активності еритроїдних клітин.

The present article reports the characterization of high-molecular-mass ATP-dependent proteinase from the erythroid ceils of neonatal piglets. The enzyme was purified by DEAE-Toyopearl 650M, Toyopearl HW-55 gel filtration and hydroxyapatite chromato-graphies. The molecular mass of enzyme has been found to be 700±50 kDa by gel filtration, the optimum activity was observed at around pH 8.5. The enzyme hydrolysed synthetic substrate Suc-Leu-Leu-Val-Tyr-MCA and showed proteolytic activity towards casein and several o ther proteins in the presence of ATP. The degradation of the protein substrates was stimulated by 0.05 % sodium dodecyl sulfate and linoleic acid. The casein-hydrolyzing activity decreased in the presence of phenylmethylsulfonylfluoride and n-chloromer-curibenzoic acid. T he enzyme activity reached high levels in the proliferating erythroblasts of animal bone marrow and decreased as the cells matured. The high levels of the proteinase activity were observed in the erythroid cells of newborn piglets, whereas in the cells of 10-days-old animals the enzyme activity was significantly lower. A role of ATP-dependent high-molecular-mass proteinase in functional activity of animal erythroid cells in the neonatal period discussed.