Multiplex PCR assay for detection of human interferon alpha2b gene in transgenic plants

Abstract

During the last decade interferons are regarded as potent candidates for generation of plant-based edible vaccines because of broad spectrum of antiviral activities and adjuvant properties. Establishment and certification of numerous interferon producing plant systems requests development of fast and efficient multiplex PCR protocol for the transgene detection in GM plants. Here we represent a protocol for simultaneous amplification in one assay of fragments of hIFN alpha 2b gene and two control genes, namely virD1 of Agrobacterium tumefaciens and conservative region of plant actin gene.

В последнее десятилетие интерфероны рассматриваются как перспективные кандидаты для получения из растений в виде съедобных вакцин, поскольку обладают широким спектром антивирусной активности и адъювантными свойствами. Создание и сертификация многочисленных растительных систем, продуцирующих рекомбинантный интерферон, делают актуальной разработку быстрого и эффективного протокола мультиплексной ПЦР для определения данного трансгена в генетически модифицированных растениях. В настоящей публикации мы приводим метод детекции гена человеческого интерферона альфа-2b в трансгенных растениях с помощью совместной амплификации в ходе одной реакции фрагментов гена hINTα2b и двух контрольных генов, virD1 Agrobacterium tumefaciens и консервативного участка гена актина растений.

В останнє десятиліття інтерферони розглядаються як перспективні кандидати для отримання з рослин у вигляді їстівних вакцин оскільки, вони мають широкий спектр антивірусної активності й ад’ювантні властивості. Створення і сертифікація численних рослинних систем, які накопичують рекомбінантний інтерферон, роблять актуальною розробку швидкого й ефективного протоколу мультиплексної ПЛР для визначення даного трансгена в генетично модифікованих рослинах. В цій публікації ми наводимо метод детекції гена людського інтерферону альфа-2b у трансгенних рослинах за допомогою сумісної ампліфікації в ході однієї реакції фрагментів гена hINTα2b і двох контрольних генів, virD1 Agrobacterium tumefaciens і консервативної ділянки гена актину рослин.